成绩：
山东学医学院
药理学实验设计
题 目：天然产物降血糖作研究
设计者：
专 业：床药学
班 级：08级床药学
联系电话：
2011年 X月 X日
立题（说明研究目意义国外研究现状参考文献）
目
通实验验证天然产物科罗索酸胰岛素增敏作
通实验验证天然产物五倍子酸胰岛素增敏作
通实验确定科罗索酸五倍子酸降血糖活性方面交互作床Ⅱ型糖尿病药提供效
研究意义
WHO报告预计2025年全球20—79岁糖尿病患者达3．33亿中发展中国家患者增长速度远远超发达国家[1]新英格兰医学杂志发表国学者2007—2008年国域14省市进行糖尿病患病率调查结果[2]该调查显示国20岁群中男性女性糖尿病患病率分达10．6％8．8％总体患病率已达9．7％推算出国总糖尿病患病数达9200万．已超印度成世界糖尿病患者国家糖尿病导致死亡数发达国家已列心脑
糖尿病种慢性终身性疾病中2型糖尿病占90％[3]患病率高发症发生率高会造成组织器官损害具致残致死性危害严重长期病程严重影响患者生活质量时患者造成沉重心理负担家庭社会造成严重济负担[4]
现广泛胰岛素等药物病产生赖拮抗合成类药物作慢活性低副作较糖尿病患者急切需方便作高效稳定持久毒性副作较降血糖新药[5]通次实验研究验证两种药物间配伍作类药物床联合药提供效起积极意义
国外研究现状
年国外寻找治疗糖尿病药物目标转具降血糖活性天然产物天然产物降血糖成分特点①作温稳定持久②毒性反应非常
低③般兼降血脂抗血板聚集等功④天然产物中通常种降糖成分存⑤数天然产物降血糖成分性质稳定通口服药方便[6]
具降血糖活性天然产物发现糖尿病预防治疗提供新途径开发新高效低毒口服降血糖药物
科罗索酸五倍子酸作机制：
科罗索酸(corosolic acid)二者均抑制蛋白酪氨酸磷酸酶 1B (PTP1B)活性提高胰岛素敏感性治疗Ⅱ型糖尿病
石榴(Punica granatum)花甲醇提取物提高PPARγmRNA表达改善胰岛素受体胰岛素敏感性达降血糖作甲醇提取物里化合物五倍子酸
两种药物作机制间存相互作联合床应中起更作团队开展两种药物实验研究
参考文献：
[1]King HAu bert REHerman W．Global Prevalence of Diabetes．1995·2005 Prevalencenumerical estimates and projections[J]．Diabetes Care19982l(9)：1414—1431．
[2]Yang WYLu JMWeng JPet a1．Prevalence of diabetes among menand women in China[J]．N Engl J Med2010362(12)：10901101．
[3]李秀钧董砚虎程丽霞等．糖尿病研究进展——第16届国际糖尿病联盟会纪[J]．Clin J Endocrinol Metab．199814(2)：7277．
[4]中国卫生部疾病控制司．中国糖尿病防治指南[M]．北京：北京学出版2005：23．
[5] 殷建华李晋川曹康代富英等天然产物降血糖活性成分研究进展成医学院学报2007：27
[ 6 ]郭舜民郭尧惠天然药降血糖成分研究进展[J]海峡
药学 2000 12 (1) 15
[ 7 ] 郭啸华刘志红李恒朱加明黎磊石等实验性2型糖尿病鼠模型建立肾脏病透析肾移植杂志第9卷4期20008
实验材料（包括动物品种规格数量源药品名称规格源仪器设备等）
体重相雌雄半Ⅱ型糖尿病鼠40科罗索酸五倍子酸10g材料品种规格数量源表示：
名称
品系
规格
价格
源厂家
Ⅱ型糖尿病鼠
GK（spf）
50250克
200
海斯莱克实验动物限公司
科罗索酸
科罗索酸98
380kg
长沙禾生物科技限公司
没食子酸
没食子酸99
75kg
海金锦乐实业限公司
仪器设备：
葡萄糖氧化酶法试剂盒海丰汇医学科技限公司 生产
紫外见光分光光度计
实验方法（详细写明实验步骤尤动物分组药途径剂量观察指标数处理等）
140Ⅱ型糖尿病鼠机分ABCD四组组10雌雄半分记A1~A10 B1~B10 C1~C10 D1~D10
2四组鼠分试前禁食8时然葡萄糖氧化酶法[1]空腹状态分测定组鼠血糖浓度记作GA1~GA10 GB1~GB10 GC1~GC10 GD1~GD10
3 A组作组BCD三组作实验组表格剂量[2]鼠尾部静脉注射药
组
注射药物标准
A
1ml100g生理盐水
B
15mg100g科罗索酸+1ml100g生理盐水
C
70mg100g五倍子酸+1ml100g生理盐水
D
15mg100g科罗索酸+70mg 100g五倍子酸+1ml100g生理盐水
4分注射2h4h6h8h10h12h[3]测定组鼠血糖浓度取5点中低血糖浓度分记作gA1~gA10gB1~gB10gC1~gC10gD1~gD10
5 组鼠注射药物低血糖浓度值减注射前血糖浓度分记作dA1~dA10dB1~dB10dC1~dC10dD1~dD10专业统计学软件SAS中ANOVA程步[4]四组d值进行两素析设计根素计算P值检验水准α[4]较确定科罗索酸五倍子酸两药物作降血糖效果否明显
说明：[1] 前实验室常血糖测定方法：葡萄糖氧化酶法糖激酶法邻苯甲胺法等选择葡萄糖氧化酶法拥特异性高结果准确操作简单易掌握优点适合量标检验实验程需次测定血糖浓度采法较合适国已根方法原理设计试剂盒操作更加简便鼠需取血次采取剪尾取血法试剂盒血糖浓度计算公式：
手工测试程序
样(S) 校准(CAL) 空白(B)
样 (µl)
10 — —
校准液 (µl)
— 10 —
蒸馏水 (µl)
— — 10
试 剂 (µl)
1000 1000 1000
置 37℃水浴 10分钟波长505nm色杯光径10cm空白调零点测定吸光度（A）值
计算
[2] 药剂量标准分参降血糖功子科罗索酸研究进展Ⅱ型糖尿病鼠模型建立辅助降血糖功评价中应
[3] 科罗索酸五倍子酸两药物消半衰期起效时间未知采时间点测定血糖浓度终确定药物降血糖效果
[4] ANOVA程步进行方差分析检验水准α般定005
预期结果分析
1B组科罗索酸应P值005说明科罗索酸鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
2C组五倍子酸应P值005说明科罗索酸鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
3D组科罗索酸五倍子酸注射组应P值005说明两药物交互作鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
预期结
文献中已报导科罗索酸五倍子酸鼠显著降血糖作BC两组P值应该均005两种药物作机制作靶点存竞争性拮抗作D组P值应该005实验终预期结科罗索酸五倍子酸两种药物时均鼠产生明显降血糖作
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药理学实验设计
题 目：天然产物降血糖作研究
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专 业：床药学
班 级：08级床药学
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2011年 X月 X日
立题（说明研究目意义国外研究现状参考文献）
目
通实验验证天然产物科罗索酸胰岛素增敏作
通实验验证天然产物五倍子酸胰岛素增敏作
通实验确定科罗索酸五倍子酸降血糖活性方面交互作床Ⅱ型糖尿病药提供效
研究意义
WHO报告预计2025年全球20—79岁糖尿病患者达3．33亿中发展中国家患者增长速度远远超发达国家[1]新英格兰医学杂志发表国学者2007—2008年国域14省市进行糖尿病患病率调查结果[2]该调查显示国20岁群中男性女性糖尿病患病率分达10．6％8．8％总体患病率已达9．7％推算出国总糖尿病患病数达9200万．已超印度成世界糖尿病患者国家糖尿病导致死亡数发达国家已列心脑
糖尿病种慢性终身性疾病中2型糖尿病占90％[3]患病率高发症发生率高会造成组织器官损害具致残致死性危害严重长期病程严重影响患者生活质量时患者造成沉重心理负担家庭社会造成严重济负担[4]
现广泛胰岛素等药物病产生赖拮抗合成类药物作慢活性低副作较糖尿病患者急切需方便作高效稳定持久毒性副作较降血糖新药[5]通次实验研究验证两种药物间配伍作类药物床联合药提供效起积极意义
国外研究现状
年国外寻找治疗糖尿病药物目标转具降血糖活性天然产物天然产物降血糖成分特点①作温稳定持久②毒性反应非常
低③般兼降血脂抗血板聚集等功④天然产物中通常种降糖成分存⑤数天然产物降血糖成分性质稳定通口服药方便[6]
具降血糖活性天然产物发现糖尿病预防治疗提供新途径开发新高效低毒口服降血糖药物
科罗索酸五倍子酸作机制：
科罗索酸(corosolic acid)二者均抑制蛋白酪氨酸磷酸酶 1B (PTP1B)活性提高胰岛素敏感性治疗Ⅱ型糖尿病
石榴(Punica granatum)花甲醇提取物提高PPARγmRNA表达改善胰岛素受体胰岛素敏感性达降血糖作甲醇提取物里化合物五倍子酸
两种药物作机制间存相互作联合床应中起更作团队开展两种药物实验研究
参考文献：
[1]King HAu bert REHerman W．Global Prevalence of Diabetes．1995·2005 Prevalencenumerical estimates and projections[J]．Diabetes Care19982l(9)：1414—1431．
[2]Yang WYLu JMWeng JPet a1．Prevalence of diabetes among menand women in China[J]．N Engl J Med2010362(12)：10901101．
[3]李秀钧董砚虎程丽霞等．糖尿病研究进展——第16届国际糖尿病联盟会纪[J]．Clin J Endocrinol Metab．199814(2)：7277．
[4]中国卫生部疾病控制司．中国糖尿病防治指南[M]．北京：北京学出版2005：23．
[5] 殷建华李晋川曹康代富英等天然产物降血糖活性成分研究进展成医学院学报2007：27
[ 6 ]郭舜民郭尧惠天然药降血糖成分研究进展[J]海峡
药学 2000 12 (1) 15
[ 7 ] 郭啸华刘志红李恒朱加明黎磊石等实验性2型糖尿病鼠模型建立肾脏病透析肾移植杂志第9卷4期20008
实验材料（包括动物品种规格数量源药品名称规格源仪器设备等）
体重相雌雄半Ⅱ型糖尿病鼠40科罗索酸五倍子酸10g材料品种规格数量源表示：
名称
品系
规格
价格
源厂家
Ⅱ型糖尿病鼠
GK（spf）
50250克
200
海斯莱克实验动物限公司
科罗索酸
科罗索酸98
380kg
长沙禾生物科技限公司
没食子酸
没食子酸99
75kg
海金锦乐实业限公司
仪器设备：
葡萄糖氧化酶法试剂盒海丰汇医学科技限公司 生产
紫外见光分光光度计
实验方法（详细写明实验步骤尤动物分组药途径剂量观察指标数处理等）
140Ⅱ型糖尿病鼠机分ABCD四组组10雌雄半分记A1~A10 B1~B10 C1~C10 D1~D10
2四组鼠分试前禁食8时然葡萄糖氧化酶法[1]空腹状态分测定组鼠血糖浓度记作GA1~GA10 GB1~GB10 GC1~GC10 GD1~GD10
3 A组作组BCD三组作实验组表格剂量[2]鼠尾部静脉注射药
组
注射药物标准
A
1ml100g生理盐水
B
15mg100g科罗索酸+1ml100g生理盐水
C
70mg100g五倍子酸+1ml100g生理盐水
D
15mg100g科罗索酸+70mg 100g五倍子酸+1ml100g生理盐水
4分注射2h4h6h8h10h12h[3]测定组鼠血糖浓度取5点中低血糖浓度分记作gA1~gA10gB1~gB10gC1~gC10gD1~gD10
5 组鼠注射药物低血糖浓度值减注射前血糖浓度分记作dA1~dA10dB1~dB10dC1~dC10dD1~dD10专业统计学软件SAS中ANOVA程步[4]四组d值进行两素析设计根素计算P值检验水准α[4]较确定科罗索酸五倍子酸两药物作降血糖效果否明显
说明：[1] 前实验室常血糖测定方法：葡萄糖氧化酶法糖激酶法邻苯甲胺法等选择葡萄糖氧化酶法拥特异性高结果准确操作简单易掌握优点适合量标检验实验程需次测定血糖浓度采法较合适国已根方法原理设计试剂盒操作更加简便鼠需取血次采取剪尾取血法试剂盒血糖浓度计算公式：
手工测试程序
样(S) 校准(CAL) 空白(B)
样 (µl)
10 — —
校准液 (µl)
— 10 —
蒸馏水 (µl)
— — 10
试 剂 (µl)
1000 1000 1000
置 37℃水浴 10分钟波长505nm色杯光径10cm空白调零点测定吸光度（A）值
计算
[2] 药剂量标准分参降血糖功子科罗索酸研究进展Ⅱ型糖尿病鼠模型建立辅助降血糖功评价中应
[3] 科罗索酸五倍子酸两药物消半衰期起效时间未知采时间点测定血糖浓度终确定药物降血糖效果
[4] ANOVA程步进行方差分析检验水准α般定005
预期结果分析
1B组科罗索酸应P值005说明科罗索酸鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
2C组五倍子酸应P值005说明科罗索酸鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
3D组科罗索酸五倍子酸注射组应P值005说明两药物交互作鼠明显降血糖效果否明显降血糖效果
预期结
文献中已报导科罗索酸五倍子酸鼠显著降血糖作BC两组P值应该均005两种药物作机制作靶点存竞争性拮抗作D组P值应该005实验终预期结科罗索酸五倍子酸两种药物时均鼠产生明显降血糖作
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