酶切-连接-转化

铺***磊

贡献于2014-11-09

字数:679

酶切连接转化
：酶切
1）载体：pNZ814820度冰箱第二格子橙色放15ml离心板（特征：盖写pnz1pnz2pnz3pnz18已没面吸附柱面15ml离心）载体浓度较高27号做酶切回收回收产物（加溶胶液未纯化）20度冰箱需DNA回收试剂盒提取
2）目基：均连T5载体R基位置特征pNZ8148面写(R1R2R3…)R已提质粒酶切没切开测nano决定重新摇酶切
3）保藏菌种均20度冰箱第二格（袋中袋写igem带功基菌种保存中袋中袋袋里菌）
4）B基15ml离心里20度冰箱第二格白色盒子量挺十合起标号忘面分出
5）酶处缺（赵老师HindIII（NEBTARARA）尹老师XbaI（NEB））TAKARA缓液1*MNEBNEBuffer 2NEBBuffer 2体系量10（100u体系加10ul）
6）酶切3h
二：连接
连接酶（没做加连接酶）问问李贽张贺（张贺回话）加完基载体酶缓液（知道加加）加solution 23忘
三：转化
1）TransT1问赵信组
2）氯霉素板4°冰箱数第格写着CmpNZ8148氯霉素抗性

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