分子生物学复题(详细答案)
绪
思考题：（P9）
1 广义狭义写出分子生物学定义？
广义讲分子生物学包括蛋白质核酸等生物分子结构功研究分子水阐明生命现象生物学规律
狭义概念分子生物学范畴偏重核酸（基）分子生物学研究基DNA结构功复制转录表达调节控制等程中涉程相关蛋白质酶结构功研究
2现代分子生物学研究容方面？什反生物学？什基组时代？
研究容： DNA复制转录翻译基表达调控研究DNA重组技术结构分子生物学
反生物学：指利重组DNA技术离体定诱变方法研究已知结构基相应功体外基突变导入体检测突变遗传效应表型探索基结构
基组时代：研究细胞全部基表达图式全部蛋白质图式类基组研究结构功转移
3写出三分子生物写学展事件（年代发明者简容）
1953年WatsonClick发表脱氧核糖核苷酸结构著名文提出DNA双螺旋结构模型
1972~1973年重组DNA时代HBoyerPBerg等发展重组DNA技术完成第细菌基克隆开创基工程新纪元
1990~2003年美日英法俄中六国完成类基组计划解读类遗传密码
421世纪分子生物学发展趋势样？
着基组计划完成类已掌握模式生物遗传密码迎基组时代类基组研究重点结构功转移相关学说理相应诞生功基组学蛋白质组学生物信息学生命科学进入全新时代
第四章
思考题：（P130）
1 基概念？基研究分发展阶段？
概念：基原核真核生物病毒DNARNA分子中具遗传效应核苷酸序列遗传基单位突变单位控制形状功单位
发展阶段：20世纪50年代前细胞染色体水进行研究属基染色体遗传学阶段
20世纪50年代DNA分子水进行研究属分子生物学阶段
20年直接克隆目基出发研究基功表型间关系反生物学阶段
5什C值C值矛盾？表现？
C值：真核生物单倍体基组包含全部DNA量成该物种C值
C值矛盾（悖理）：指真核生物中DNA含量反常现象
表现：C值生物进化程度复杂性增加
关系密切生物C值相差甚
真生物DNA量远远编码蛋白质等物质需量
6断裂基外显子含子概念什？关系？
断裂基：基部插入编码序列完整基分隔成连续干区段样基做连续基断裂基
外显子：真核生物连续基中编码功区段称外显子
含子：编码功区段称含子
关系：真核生物基组中连续基存种组织表达表达序列保持变部外显子含子数目位置长度变
含子外显子间连接位点：保守序列序列源性互补性
7重叠基初什生物中发现？重叠基存意义？
&X174噬菌体
重叠基存意义：提高基利率
8分写出病毒原核真核生物基组概念请较特点异
病毒基组：病毒中含整套基包括构成基基间区域DNA
基组特点：细菌相较病毒基组含遗传信息少编辑少数蛋白质
基组DNARNA组成种病毒含种核酸核酸结构单链双链闭合环状线状分子
病毒基组通常重叠重叠基核苷酸序列转录mRNA读框基相读框起始密码子终止密码子
病毒基组部分序列编码蛋白质基间间隔序列非常短非编码区占部分
病毒基组中功相关基般集中成簇特定部位构成相功单元转录单元转录产物般反子mRNA加工成蛋白质mRNA
噬菌体基连续
原核生物基组：原核生物染色体质粒中含整套基
特点：基通常仅条环形线形双链DNA分子组成
复制起始点
操子结构数相关结构基串联起受统调控区调节合成反子mRNA
编码蛋白质结构基单拷贝rRNA基般拷贝
非编码DNA占例少类似病毒基
基组DNA具种调控区复制起始区复制终止区转录启动子转录终止区等特殊序列重复序列病毒基组复杂
真核生物基类似具移动DNA序列组分
真核生物基组：真核生物单倍染色体组细胞器中含整套基
特点：真核基组分子质量相复杂度
线状染色体条染色体复制起点
细胞核DNA蛋白质稳定结合形成染色质复杂高级结构
基表达中转录翻译时间空间分隔偶联
量重复序列单位长度重复程度异
基般点拷贝形式存转录产物单反子mRNA
存着移动DNA序列
绝数真核生物基含含子基编码区连续排列
异：红色标记相点绿色点
9简叙述真核生物DNA序列种类型
单拷贝DNA序列
低度重复DNA序列2~10拷贝数
中度重复DNA序列十数十万拷贝数
高度重复DNA重复次数万数百次
10含子什功？存意义？
促进重组
增加基组复杂性
含读框
基组中外显子含子相含子具编码序列产生蛋白质功RNA
含部分剪接信号
产生核仁RNA
含子基表达影响
存意义：利变异进化增加重组机率提高进化率
14类基组研究容？研究类基组重意义？
研究容：类全基组作图染色体作图（包括遗传连锁作图物理作图）基组进行标记划分基特定DNA序列染色体位置提供标志进步包括绘制转录图谱
基组DNA进行裂解切割基克隆百甚千碱基长度DNA片段已知标识进行序排列
测定基组全部DNA序列全部DNA进行序列分析染色体位置进行排列染色体DNA序列全部
基鉴定确定基结构分离鉴定具重功重疾病相关基
建立基信息系统基信息储存处理开发相应软件
重意义：
16什功基组学？基芯片？蛋白质组学？生物信息学？
功基组学：指利结构基组学提供信息规模实验方法统计计算分析全面系统分析全部基功学科
基芯片： 利原位合成法已合成系列寡核苷酸探针分子预先设定排列方式固定固相支持界面表面（硅片玻片尼龙膜等）形成形成高密度寡核苷酸阵列样品进行杂交通检测杂交信号强度分布进行分析
蛋白质组学：指研究某基组某特定细胞特定时间表达全部蛋白质集合体蛋白修饰种形态
生物信息学：
17分子生物学信息数库4类？
基组数库
核算蛋白质级结构序列数库
生物分子三围构象数库
三类数库文献资料基础构建二次数库
18名词解释：基家族 基簇 假基 HGP STS SAGE BAC YAC ORF
基家族：真核生物基生物基组中源相结构相似功相关组基
基簇：基家族中成员紧密成簇排列成段串联重复单位定位染色体特殊区域属祖先基扩增产物基簇中包含没生物功假基通常基簇序列源性基族间序列源性
假基：基家族中成员DNA序列结构功基相似表达产生功基产物基称假基
HGP Human genome project 类基组计划
STS Sequencetagged site 序列标签位点段300~500bp已知序列染色体定位置
SAGE serial analysis of gene expression 基表达系统分析 原理cDNA3端段9~11bp短序列包含代表该转录足够信息够区分该基组中95﹪基段特定序列称SAGE标签显示代表基否表达表达程度
BAC bacterial artificial chromosome 细菌工染色体
YAC yeast artificial chromosome酵母工染色体
ORF读框
第六章 DNA损伤修复基突变
思考题：（P186）
1 什DNA损伤？DNA结构改变两种类型？危害？
DNA损伤指生物体生命程中DNA双螺旋结构发生改变
DNA结构发生改变两种类型：单基改变双螺旋结构异常扭曲
危害：单碱基改变影响DNA序列影响整体构象DNA双螺旋分开时影响转录复制程通序列变化改变子代遗传信息
双螺旋结构异常扭曲DNA复制转录产生生理性伤害
2 DNA分子碱基发性化学改变造成种损伤？
互变异构移位
脱氨基作
DNA聚合酶滑
活性氧引起诱变
碱基丢失
3 化学素引起DNA损伤种？写出点？
烷化剂DNA损伤：烷化剂类亲电子化合物容易生物体中分子亲核位点起反应碱基烷基化碱基脱落断裂交联（具体见课件）
碱基类似物DNA损伤：工合成碱基类似物作促突变剂抗癌药物5溴尿嘧啶（5BU）5氟尿嘧啶（5FU）2氨基腺嘌呤（2AP）等
4 什事DNA修复？细胞DNA损伤种修复系统什？
DNA修复： 指针已发生缺陷进行补救机制指生物体细胞长期进化程中形成种保护功
修复系统： 切修复（excision repair）：碱基切修复核苷酸片段切修复
错配修复：（mismatch repair）校正活性漏校碱基复制保真性提高100～1000倍
直接修复：(direct repair)损伤碱基回复原状态种修复
重组修复：(recombination repair)机体细胞复制起始时尚未修复DNA损伤部位先复制修复种方式~
易错修复 (error prone repair) SOS反应诱导修复系统中易产生差错修复易产生差错修复SOS反应诱导产生缺乏校功DNA聚合酶DNA链损伤部位出现配碱基复制继续进行增加细胞存活机会时程带高突变率
5 什SOS反应？SOS反应什物质引起？意义？
SOS反应：许造成DNA损伤抑制DNA修复程引起系列复杂诱导效 应种诱导效应称应急效应（SOS response）
引起物：SOS反应RecA蛋白LexA阻遏物相互作引起
意义：DNA修复
导致变异
DNA复制受阻碍情况避免细胞分裂产生含DNA细胞者细胞更重组修复机会
6 基突变概念？简写明基突变种类型什突变热点？
基突变：基遗传物质发生遗传结构数量变化通常产生定表型
类型：碱基换（点突变）：DNA错配碱基复制固定原碱基碱基取代包括转换（嘌嘌嘧嘧）颠换（嘌嘧嘧嘌）两种类型
插入突变：基序列中插入碱基段外DNA导致突变两种方式：拷贝复制移动指位点序列复制插入令位点非拷贝移换DNA序列位点直接移动位点
义突变：基突变改变密码子组成密码子简性未改变编码氨基酸突变称声突变中性突变
错义突变：基突变改变编码氨基酸种类位置突变程度影响蛋白质酶活性
义突变：基突变氨基酸密码子变成终止密码子时导致翻译提前结束
移码突变：非三正倍数核苷酸插入缺失导致编码区该位点三联体密码子读框改变错误氨基酸发生错误基产物完全失活
缺失突变：指碱基段DNA序列中删较长核苷酸序列丢失引起突变种突变难回复
渗漏突变：突变基产物尚部分活性错义突变表型介野生型完全突变型间某种状态
回复突变：突变体恢复原野生型突变程
突变热点：DNA分子意位点发生频率相等某位点发生突变频率远远高均数称突变热点
7 导致DNA分子发生诱变诱变剂？
碱基类似物
碱基修饰剂
嵌入染料
紫外线电离辐射
8 名词解释：
MRS SSB MEC
MRS Mismatch Repair Systerm错配修复系统（组成作见课件）
SSB
MEC Mismatch correct enzyme 错配矫正酶（组成应见课件）
第七章DNA重组转座
复题（P212）
1 简述DNA重组概念意义
概念：DNA分子分子间发生遗传信息重新组合称遗传重组基重排
意义：迅速增加群体遗传样性利突变利突变分开：通优化组合积累意义遗传信息参许重生物学程DNA损伤复制障碍提供修复机制某基表达受DNA重组调节
2 DNA重组包括程？DNA重组关酶？
DNA重组Holliday模型四关键步骤：
①两源染色体DNA排列整齐
②DNA条链断裂DNA应链连接形成连接分子称Holliday中间体
③通分支移动产生异源双链（hetero duplex)DNA
④Holliday中间体切开修复形成两双链重组体DNA
酶：RecA 蛋白催化双链单链 DNA 反应阶段
RecBCD（外切核酸酶Ⅴ）具ATP解旋酶（旋）活性ATP增强切核酸酶活性赖ATP外切核酸酶活性
原核源重组蛋白
a RuvA 识 Holliday 结构连接点4聚体
b RuvB 分枝迁移提供动力（ATPase 10～20bps） 6聚体
c RuvC 核酸切酶专性识 Holliday 结构连接点
体外切断连接点拆分重组体识称四核苷酸5’ATTTGC
d DNA聚合酶DNA连接酶进行修复合成
3 什源重组？什Holiday模型？什特异位点重组？
源重组：称般性重组两条源区DNA分子通配链断裂连接产生片段间交换程
Holiday模型：源重组分子模型
Holiday中间体：源重组中连接两DNA双链交换中间物含4股DNA链连接处转换配形成交叉链连接点种结构称Holiday中间体
特异位点重组：整合酶催化两DNA序列特异位点间发生整合位点定源性赖DNA序列源性赖某酶特异结合DNA序列
4 细菌基转移机制？
接合作(conjugation）：细菌细胞相互接触时遗传信息细胞转移细胞称~
转化(transformation)：细菌品系吸收外援DNA（转化子）发生遗传性状改变现象
转导（transduction）：通噬菌体细菌基供体转移受体细胞程两种类型：普遍性转导局限性转导
细胞融合（cell fusion）：细胞质膜融合导致基转移重组
5 简述转座子概念转座子分类？什插入序列（IS）？
转座子：基组中移动段DNA序列直接基组位点移位点（供体受体）
转座：转座子基组位置转移位置程称转座
分类：转座子构成分插入序列（IS）复合型转座子（Tn）
插入序列（IS）：简单细菌染色体质粒某噬菌体正常组分
长度 750～1550bp
特点：a）转座酶基两端IR转座酶识位点（反重复序列）
b）插入靶位点会出现靶位点正重复（5～9bp）
c)较07515kb
6 复合型转座子（Tn）IS元件什异点？
特征：a）两端15～25bpInverted repeat IR反重复序列转座酶必需
b）具编码转座酶（transposase）基
c)转座两端正重复序列
点：Tn转座子中转座酶基外带药物抗性基(相关基)标志结构较复杂
7 简述复制型转座非复制型转座机制
复制型转座：转座子元件复制移动受体位点终转座程扩增转座子拷贝（供受点）特征：
1）转座原位置转座子保持变
2）新位置转座子两侧出现重复序列
3）转座程中合体(cointegrate
非复制型：称保留性转座转座元件直接部位转移部位原部位没保留利供体靶DNA序列直接连接需转座酶
非复制型转座程
（1）转座酶转座子供体DNA中释放出
转座酶受体DNA靶位点形成交错切口
（2）转座子插入交错切口(转座酶转酯反应)
（3）连接修复缺口单链受体DNA产生重复序列
8 转座子转座特征方面？
①基组位点转移位点复制子转移复制子
②独立形式存(噬菌体质粒DNA)基组部位直接转移部位
③转座子编码身转座酶次移动时携带转座必需基起基组跃迁转座子称跳跃基
④转座频率低插入机赖转座子(供体)靶位点(受体)间序列源性
⑤转座子插入结构基基调节序列引起基表达容改变例该基失活果重基导致细胞死亡
• 赖供体序列靶位点间序列源性赖recA
• 转座靶序列重复
• 转座插入靶位点非完全机（插入专型）
• 转座具排性(转座免疫性)Tn3排斥类转座子插入
• 转座具极性效应结构基功丧失表达水降
• 活化沉默基
• 区域性优先
9 DNA转座引起什遗传学效应
1引起基突变——插入切离
2插入位置染色体DNA重排产生新基
3转座产生染色体畸变（缺失倒位等）
4产生新变异利进化
10 什逆转录转座子？逆转录子基组功重影响？
逆转录转座：DNARNADNA转移程称反转座逆转录转座
逆转录子：类移动子转座程中需RNA中间体逆转录程分散基组中称~
影响：基表达影响（启动基表达编码关逆转录酶影响基表达等）
逆转录子介导基重排
生物进化中起重作
第十二章 原核生物基表达调控
1 什基表达调控？基表达调控什意义？
基表达调控：生物体基表达调节控制机制细胞中基表达程时间空间处序状态环境条件变化做出适反应复杂程
基表达调控意义：基表达调控生物体细胞分化形态发生体发育分子基础适应环境维持生长增殖维持体发育分化
2 基表达调控水进行？
基水 转录水转录水翻译水翻译水
3 原核基表达调控什特点？
原核生物基表达调控存转录翻译起始延伸终止步骤中操子单位进行
细胞控制种蛋白质时期表达水然通转录水翻译水调控发生转录水正负调控两种机制负调节调节子活性受变构效应调节
转录水基表达调控决定DNA结构RNA聚合酶功蛋白质子分子配基相互作原核生物调节原件种类少包括游启动区域调控原件激活蛋白阻遏蛋白结合位点
4 乳糖子例说明操子学说建立分子生物学研究重意义？
5 简述色氨酸操子阻遏系统弱化系统？
阻遏系统：色氨酸生物合成途径第调控转录否启动
色氨酸量时阻遏蛋白形成复合物结合操基阻止结构基转录终产物组织基转录
弱化系统：第二水控制决定着已启动转录否继续进行mRNA合成起始非培养基中完全没色氨酸否转录总前导区终止转录终止发生区域称弱化子衰减子前导区分四区域四区域片段两种方式进行碱基配核糖体前导区继续翻译功控制着两种结构转换决定mRNA否形成终止需结构产生弱化效应
6 名词解释：
式作原件 ：基表达调节活性DNA序列活性影响身处DNA分子基种DNA序列通常编码蛋白质位基旁侧含子中
反式作子：编码基识结合靶核苷酸序列DNA分子
结构基 ：编码蛋白质RNA基
操子：原核生物分子水基表达调控单位调节基启动子操基结构基等序列组成通调节基编码调节蛋白诱导物辅阻遏物协作开启关闭操基结构基表达进行正负控制
IPTG ： 异丙基硫代—β—D—半乳糖苷
(p)ppGpp：细菌应急应答反应引起ppGpp（鸟苷5位3’位分连二磷酸基团）pppGpp（鸟苷5位连3磷酸基团3’位连二磷酸基团）两种异常核苷酸量增加合称~(p)ppGpp产生关闭许基表达作影响许操子称超级调控子
CAP
cAMPCAP
第十三章 真核生物基表达
1真核生物基表达调控涉生命活动程？
真核基表达调控贯穿DNA功蛋白质全程染色体 染色质活性转录转录初始产物加工翻译等调控基调控重调节程
2简概括真核生物基表达调控7层次？
染色体染色质水结构变化基活化调节
转录水调控包括基开关转录效率高低
RNA加工水调控包括初始转录产物特异性剪接修饰火花编辑等
转录加工产物细胞核细胞质转运程中受调控
翻译水控制种mRNA结合核糖体进行翻译选择蛋白质合成量控制
蛋白质合成选择性激活控制蛋白质酶分子水剪切活性水控制
控制mRNA选择性降解调控
3真核生物基表达调控原核生物相什异点？
点：（新书P390）
原核细胞染色质裸露DNA真核生物细胞染色质DNA组蛋白紧密结合形成核体原核生物中染色质结构基表达没明显调控作真核生细胞中种作十分明显
原核基转录调控中激活物调控（正调控）阻遏物调控（负调控）二者种重（新书P410真核原核生物转录水调节控制第3点第5行原核生物通常负调控）真核细胞中然正调控成分负调控成分正调控真核基通常调控序列必须激活物时特异结合协作调节基转录
原核基转录翻译通常偶联真核生物时空分开调控更复杂
调控特异性表达机制（细胞特异性组织特异性）
相点：转录水调控转录水调控转录水调控重
结构基游游（甚部）存许特异调控成分异蛋白质子调控成分结合否调控基转录
起源相分子基础
4简述转录水真核生物原核生物调控区？
①原核生物功相关基常组织起构成操子作基表达调节单元真核生物基组成操子基身基启动子调节元件单独进行转录相关基间存着协调节拥式作元件反式作子基组成基群(gene battery)
②原核生物调节元件种类较少包括游启动区域调控元件激活蛋白(activator)阻遏蛋白(repressor)结合位点真核生物调节元件种类包括游调节元件组成型元件增强子沉默子反式作子激活子阻遏子等许短序列组成独立活化基表达基组中许中等重复序列作调节元件
③原核真核生物转录受反式调节子(转录激活子抑制子)调节类调节两水进行：通调节子生物合成(种类数量调节)程缓慢持续涉细胞分化等二通进行构象转变价修饰(活性调节)真核生物正调节．真核生物基表达调节子价修饰磷酸化磷酸化调节
④真核生物具染色质结构基活化首先需改变染色质状态转录子够接触作启动子称程染色质改型(chromatin remodeling)染色质水调节涉真核生物发育细胞分化等调节
5什增强子？特点？增强子转录正调控作？
增强子：指连锁基转录频率明显增加DNA序列发挥作方式通常方 距离关具组织特异性般转录激活子结合通作转录起始复合物增强RNA聚合酶活性 促进转录
增强子作特点：
增强转录作明显
位基组位置没基专性
具方性
远距离作
增强效应具组织细胞特异性特定蛋白质参发挥作
重复序列般长50bp
核心序列 (G)TGGATATAT(G)
许增强子受外部信号调控
增强子转录正调控作：
增强子UPE反式作调控子结合引起DNA构象变化甚DNA螺旋弯曲形成环状结构结合增强子种反式作子间相互作接触作启动子种蛋白质子促进转录起始物（PIC）组装激活转录
增强子序列原件特异蛋白质子结合位点模板DNA固定细胞核特定结构核基质利DNA拓扑异构酶发挥作
6简述Britten—Davidson模型该模型特点？
通特定激活子时控制含相受体基许结构基协表达含相受体基结构基组成组（set）
（1）重调节基：果传感基控制整合基时产生种激活子组基时激活进行协表达
（2）重受体基：果结构基邻具受体基受体基特异性激活子识结构基情况表达
特点：许基时调控调节单位（整合基受体基）重复性DNA序列
7反式作子DNA结合结构域？
DNA结合结构域转录激活结构域二聚化结构域
8常见蛋白质DNA结合区域特殊结构基序种类？
螺旋—转角—螺旋结构基序螺旋—突环—螺旋结构基序锌指结构基序亮氨酸拉链结构基序碱性结构基序β折叠
9名词解释
绝缘子：绝缘子(insulator)年发现类特殊式作元件增强子功阻止激活阻遏作染色质传递染色质活性限定结构域
HTH helixturnhelix螺旋—转角—螺旋结构基序：2a螺旋b转角隔开识螺旋DNA沟中特异结合段螺旋DNA非特异结合
HLH Helixloophelix 螺旋—突环—螺旋结构基序：40～50aa时具DNA结合形成蛋白质二聚体功含2亲脂性ahelix（15~16aa） 连接区（9~20aa）连接两性螺旋形成两面代表疏水氨基酸面代表带电氨基酸蛋白质通两螺旋相应表面疏水残基相互作形成源二聚体异源二聚体两亲性螺旋形成二聚体力HLH蛋白质具环作仅仅两螺旋区独立作
ZF zinc finger锌指结构基序含711锌9规律重复单位单位约30AA残基组成独立结构域23残基构成锌指突出部分锌离子形成维持结构关键锌指头部进入DNA分子沟中指结合5碱基45碱基5SrRNA基启动子长度接
第十四章
1 写出逆转录病毒逆转录病毒基组特点
2 逆转录酶三种酶活力？简述逆转录程？
三选择题
1RNA 合成底物
A dATP dTTP dGTP d CTP BATP TTP GTP CTP
C ATP GTP CTPUTP D GTP CTPUTPTTP
2．模板DNA碱基序列3′—TGCAGT—5′转录出RNA碱基序列：
A．5′—AGGUCA—3′ B．5′—ACGUCA—3′
C．5′—UCGUCU—3′ D．5′—ACGTCA—3′
E．5′—ACGUGT—3′
3转录终止必需
A终止子 Bρ子 CDNARNA弱相互作 D述三种
4转录终止程中时赖蛋白辅子实现终止作种蛋白辅子称
A σ 子 B ρ子 C θ子 D IF子
5．识RNA转转录终止子：
A．α子 B．β子 C．σ子 D．ρ子 E．γ子
6．DNA复制转录程许异点列DNA复制转录描述中错误：
A．体条DNA链模板转录两条DNA链模板复制
B．两程中合成方5′→3′
C．复制产物通常情况转录产物
D．两程均需RNA引物
E．DNA聚合酶RNA聚合酶需Mg2+
7核基mRNA 元拼接点序列
AAG……GU BGA……UG CGU……AG DUG……GA
8真核生物mRNA分子转录必须加工切分隔开编码序列连接起成蛋白质翻译模板程做RNA拼接
A 外显子 B 启动子 C 起始子 D 含子
9真核生物RNA polⅡ羧基端含段7氨基酸序列7肽序列TyrSerProThrSerProSer 称作
A C末端结构域 B 帽子结构
C Poly(A)尾巴 D 终止子
10．真核生物RNA拼接需种snRNP协助中识左端（5’）拼接点序列snRNP：
A．U1 snRNP B．U2 snRNP C．U5 snRNP E．U2 snRNP+ U5 snRNP
五问答题
1 简述转录基程
答：⑴全酶启动子结合封闭型启动子复合物形成（ R位点σ子发现结合 ）
⑵开放型启动子复合物形成：
①RNApol适合位点达－10序列区域诱导富含A·TPribnow 框熔解 形成12－17bp泡状物时酶分子－10序列转移牢固结合
②开放型启动子复合物RNApol聚合酶定
③两种复合物均二元复合物（全酶DNA ）
⑶开放型启动子复合物中RNApolI位点E位点核苷酸前体间形成第磷酸二酯键 （β亚基）三元复合物形成 +1位CAT模式位离开保守T 6~9 核苷酸处
⑷σ子解离 →核心酶DNA亲力降起始程结束→核心酶移动进入延伸程
2 试较原核真核细胞mRNA异
⑴原核生物
①原核生物mRNA 半衰期短
②许原核生物mRNA反子形式存
③5’端帽子结构3’端没较短poly(A)
④原核细胞mRNA（包括病毒）时编码肽
⑤原核生物常AUG（时GUG甚UUG）作起始密码子
⑵真核生物：
①5’端存帽子结构
②绝数真核生物mRNA具poly(A)尾巴
③RNA编码肽
④真核生物永远AUG起始密码子
3 Ecoli例说出Prok启动子结构部分功
答：启动子两部分组成：
游部分 — CAPcAMP结合位点（基表达调控正控制位点）
CAP：降解物基活化蛋白环腺苷酸（cAMP）受体蛋白
游部分 — RNApol进入（结合）位点 －35 ~ －10包括识位点结合位点
1） Sextama 框：35序列位复制起点游35核苷酸处6核苷酸序列RNA聚合酶全酶识结合中σ亚基识中起关键作
2） Pribonow 框：10序列位10处6核苷酸序列（TATAAT）RNA聚合酶识DNA双链中反义链确保转录链方误
4． 真核生物RNA聚合酶区分类 分转录RNA
根 α 鹅膏蕈碱敏感性分三类：
RNApolⅠ：敏感（动植昆） RNApol Ⅱ：敏感 RNApol Ⅲ：种类敏感性
转录产物：
RNApolⅠ：核仁 活性占例 转录rRNA（58S18S 28S）
RNApolⅡ：核质 负责 hnRNAsnRNA 转录
hnRNA（mRNA 前体核均RNA） snRNA（核分子 RNA ）
RNApol Ⅲ：核质 负责 tRNA5S rRNAAlu序列部分 snRNA
5． 真核生物25 ~ 35区70 ~ 80区保守序列分什？
Sextama框 (Sextama Box)35序列 数启动子中序列TTGACA
CAAT框（CAAT box）：致序GGGTCAATCT真核生物基常调节区位转录起始点游约80100bp处RNA聚合酶结合处控制着转录起始频率
6． 真核生物种启动子
真核生物中三种RNA聚合酶三种启动子：RNA polⅠ启动子RNA polⅡ启动子RNA polⅢ启动子
7． 说明poly(A)分子生物学实验中应价值
a) oligo (dT) 载体相连总体RNA中分离纯化mRNA
b) 寡聚dT（oligo (dT)）引物反转录合成 cDNA
8． EukmRNA帽子种类
帽子0 （Cap0） m7GpppXpYp（）m7G N7—甲基鸟苷
帽子1 （Cap1） m7GpppXmpYp第核苷酸 2’O 位产生甲基化 （A N6 位甲基化）
帽子2（Cap2） m7GpppXmpYmp第二核苷酸 2’O 位产生甲基化（AGCU）
9． 真核生物mRNA3poly(A)编码情况准确生成机制？
数真核生物mRNA 3＇末端100~200A组成Poly（A）尾巴
生成：a RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A) 聚合酶）催化前体－－ATP
反应： Mg++ Mn++
聚核糖核酸+nATP ————>聚核糖核酸(A)n + nPPi
b添加位点
切酶(360KDa)切段序列———> poly(A) 聚合酶催化添加poly(A)
切酶识位点（子参）
切点游 13－20bp处AAUAAA 切点游 GUGUGUG （单细胞Euk外）
10． 增强子早里发现简述5作特点
SV40两正重复研究清楚（DR）107~ 178 179 ~ 250 72bp
该增强子特点：
⑴赖TATA框转录增强效应高赖情况
⑵距离效应 离72bp越容易起始转录
⑶转录方离开72bp起始序列优先转录
⑷细胞类型选择：类型中作差异
11． 剪接体成分组成？试述剪接程中组分组装程剪接机制
剪接体：五核核糖核酸百蛋白质组成型核糖核酸蛋白质复合物称核核糖蛋白
剪接体剪接剪接涉两步骤生物化学程两步骤均需RNA间进行转酯反应tRNA剪接没交醋化转酯化程
剪接体剪接交酯化反应发生特定次序首先含子特定剪接分支位点核苷酸会含子第核苷酸产生转酯化反应形成两RNA分子含子套索含子前外显子第二第外显子核苷酸会第二外显子首核苷酸产生转酯化反应连接外显子释放含子套索
12． 真核生物mRNA前体含子剪接信号序列特征什？
mRNA前体中含子两端边界存序列序列产生mRNA前体剪接信号数细胞核mRNA前体中含子5’边界序列GU3边界AG
13． 13剪接分支位点核苷酸什？
腺嘌呤核糖核苷酸
14．什选择性剪接？说明选择性剪接果蝇性决定中作机制
选择性剪接指透基转录相premRNA剪接选择产生mRNA异构物产生种相似独特蛋白质产生出稳定性低mRNA产物达调节基表现目
15 I型含子发生改变产生酶活性果活性意味着I型含子催化中心什特点？
答：活性包括：RNA聚合酶切核酸酶磷酸酶连接酶活性I 型含子转变成酶力表明结合RNA糖—磷酸骨架催化前反应例连接剪切相反反应
16 转录涉模板链编码链分离解释转录中单链DNA样保护
答： 转录程中控板编码链分离时聚合酶覆盖整转录泡——解旋位点螺旋重新形成位点单链DNA保护起复制转录需单链结合蛋白参
17 三序列原核生物mRNA精确转录必少
答： 35(RNA聚合酶结合位点)10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列终止子
18． 原核生物真核生物启动子差？
原核生物
TTGACA TATAAT起始位点
35 10
真核生物
增强子GC CAATTATAA—5mGpp—起始位点
110 70 25
19．双链DNA分子图示体编码五氨基酸残基肽：
3’TAC ATG ATC ATT TCA CGG AAT TTC TAG CAT GTA5’
5’ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT3’
试问：（1）．条链转录模板链？
5’ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT3’
（2）．写出该五氨基酸残基肽
AUG CUA GAA AUU CCG (UGA)
分析：
5UAC AUG AUC AUU UCA CGG AAU UUC UAG CAU GUA3
3AUG UAC UAG UAA AGU GCC UUA AAG AUC GUA CAU5
7． 试证明基中条DNA链作模板转录
答：基两条链均转录RNA聚合酶5’ →3’方合成两条DNA链会相反方转录两信携带着彼互补反核苷酸序列编码肽然某DNA序双方转录常见现象早明确证通研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillus subtilis) SP8DNA特：条链(重链)富含嘌呤链(轻链)富含嘧啶双链DNA温加热两条链分离(DNA变性)密度梯度离心分离两条链 1963年Julius MarmurPaul DotySP8感染枯草杆菌细胞提取RNA发现噬菌体DNA重链杂交(互补配形成DNARNA杂合分子)会轻链杂交显易见信条DNA链(重链)互补DNA双链中条链作转录模板(图A78) MarmurDoty幸运选SP8做实验全部基条DNA链中转录噬菌体包括T4λ噬菌体部分基条链转录基条链转录噬菌体SP8做实验成功说明问题
8． 认mRNA核苷酸序列长300碱基样： (1)证明RNAmRNAtRNArRNA (2)确定真核原核mRNA
答：根序列组成进行判断： (1)序列太长tRNA果rRNA应该含许特殊元件：假 尿嘧啶5—甲基胞嘧啶 时应具形成发夹环反重复序列果 mRNA应AUG起始密码子段相应氨基酸密码子相应终止密码子构成读框 (2)真核生物mRNA5’端含7—甲基鸟苷数3’端 长po1yA尾巴原核生物mRNA具原核生物mRNA5’端l—核糖体结合序列(SD序列)
22 详述样加工真核生物mRNA 成熟
首尾修饰
15’端加帽 成熟真核生物mRNA结构5’端形成m7GpppmXpYp帽子结构
23’端加尾 数真核生物mRNA3’端聚（A)尾长约100－200核甘酸
二真核生物mRNA剪接
剪接细胞核中 hnRNA中含子连接酶作外显子部分连接起程程特点：
(1)mRNA前体剪切部位含子末端特定部位已发现数含子GU5＇端起始末端AGOH3’5＇GUAGOH3＇称剪接接口(splicing junction)边界序列剪接GUAG定剪掉
(2)套索结构形成剪接 剪接程分两步反应进行A A Klessing模式含子弯曲成套索状形成 套索RNA（larial RNA）B含子套索形式剪切外含子相连接
(3)剪接体形成 剪接体（spliceosome）种非特异核核糖核蛋白（UsnRNP）mRNA前体结合成UsnRNP族snRNA参剪接作种UsnRNP
23． 谓RNA编辑？RNA编辑生物学意义
RNA编辑：指基转录产生mRNA分子中核苷酸缺失插入置换基转录物序列基编码序列互补翻译生成蛋白质氨基酸组成基序列中编码信息现象
RNA编辑具重生物学意义： 校正作调控翻译扩充遗传信息
1）形成删AUG UAA UAG UGA…
2）改变codon信息
3）扩编码遗传信息量较程度改变DNA遗传信息该基DNA序列仅串简略意义模糊序列称隐秘基模糊基
4）中心法发展
第五章
名词解释
1．翻译 mRNA模板氨酰tRNA原料直接供体种蛋白质子酶参核糖体mRNA分子核苷酸序表达特定氨基酸序蛋白质程
2．密码子 mRNA中碱基序蛋白质中氨基酸序应关系通密码实现 mRNA中三相邻碱基决定氨基酸三相邻碱基称密码子
3．密码简性 —氨基酸具两密码子现象
4．义密码子 —种氨基酸编码密码子称义密码
5．变偶假说 指反密码子前两碱基(3’端)标准密码子前两碱基(5’端)配反密码子中第三碱墓某种程度变动种碱基配
6．移码突变 mRNA中插入删核苷酸会读码发错误称移码移码造成突变称移码突变
7．功受体 转运种氨基酸种tRNA称功受体
8．Anticodon 指tRNA反密码子环中三核苷酸序列蛋白质合成程中通碱基配识结合mRNA特殊密码
9．核糖体 mRNA时干核糖体结合形成念珠状结构称核糖体
10．Paracodon tRNA 分子决定携带氨基酸分子区域称副密码子
11．Signal peptide 某种分泌蛋白质细胞膜蛋白质等前体物质肽形式合成N末端含作通膜时信号氨基酸序列种氨基酸序列称信号肽信号序列（signal sequence）
二填空题
1．蛋白质生物合成mRNA模板氨酰tRNA原料直接供体核糖体合成杨
2．生物界64密码子中61氨基酸编码起始密码子AUG终止密码子UAA UAG UGA
3．原核生物起始tRNAtRNAf表示真核生物起始tRNAtRNAi表示延伸中甲硫氨酰tRNAtRNAm表示
4．植物细胞中蛋白质生物合成核糖体线粒体叶绿体三种细胞器进行
5．延长子TTuTs两亚基组成Tu热稳定蛋白质Ts热稳定蛋白质
6．原核生物中释放子三种中RF1识终止密码子UAAUAGRF2识UAAUGA真核中释放子RF种
7．氨酰tRNA合成酶氨基酸相应tRNA高度选择性
8．原核细胞起始氨基酸甲酰甲硫氨酸起始氨酰tRNA甲酰甲硫氨酰tRNA
9．原核细胞核糖体亚基16SrRNA协助辨认起始密码子
l0．形成肽键消耗4高磷酸键合成起始时需消耗1高磷酸键
11．肽基转移酶蛋白质生物合成中作催化肽键形成肽酰tRNA水解
12．肽链合成终止时终止子进A位识出终止密码子时终止子肽基转移酶催化作转变水解作
13．原核生物核糖体30S亚基50S亚基组成真核生物核糖体40S亚基60S亚基组成
14 蛋白质中进行磷酸化修饰氨基酸残基SerThrTyr
15 氨基酸具密码子编码氨基酸密码子称义密码
16 蛋白质跨膜需信号肽引导蛋白伴侣作辅助肽链折叠成天然构象蛋白质
17 信号识颗粒（SRP）分信号识结构域延伸作制动结构域两结构域作翻译程中够识信号序列指导核糖体转运通道
18高等哺乳动物肠杆菌基中相终止密码子UAGUGA类线粒体基终止密码子UAAUAGAGAAGG
19开放阅读框指新测DNA序列中计算机辨认出编码区域起始密码子起终止密码子止段连续密码子区域
20 tRNA反密码子UGC识密码子ACG
21 新生肽链增加氨基酸单位需进位转肽移位三步反应中进位移位反应中需分子GTP提供量
三选择题
1．蛋白质生物合成方( D )
AC→N端 B定点双进行 CN端C端时进行 DN→C端
2．合成蛋白质细胞器( C )
A线粒体 B叶绿体 C高尔基体 D核糖体
3．真核生物延伸子( D )
AEF—Tu BEF2 CEFG DEF1
4．真核生物释放子( A )
ARF BRF1 CRF2 DRF3
5．tRNA反密码子中I碱基配( D )
AAG BCU CU DUCA
6．蛋白质合成需量( C )
AATP BGTP CATPGTP DGTP
7．tRNA作( B )
A氨基酸连接氨基酸 B氨基酸带mRNA位置
CmRNA接核糖体 D增加氨基酸效浓度
8．关核糖体移位叙述正确( C )
A空载tRNA脱落发生A位 B核糖体mRNA3’→5’方相移动
C核糖体mRNA5’→3’方相移动
D核糖体mRNA次移动距离相二核苷酸长度
9．蛋白质合成中列步需消耗高磷酸键( A )
A肽基转移酶形成肽键 B氨酰tRNA核糖体A’位点结合
C核糖体mRNA移动
DfMet—tRNAfmRNA起始密码子结合亚基结合
10．真核细胞中肽链合成终止原( D )
A已达mRNA分子头 B具特异tRNA识终止密码子
C终止密码子身具酯酶作水解肽酰tRNA酯键
D终止密码子终止子(RF)识
11．蛋白质生物合成中终止密码( A D E )
AUAA BUAU CUAC DUAG EUGA
12．根摆动假说tRNA反密码子第1位碱基I时够识种密码子( A B E )
AA BC CG DT EU
13．列子真核生物蛋白质合成起始子( C D E )
AIF1 BIF2 CeIF2 DeIF4 EelF4A
14．蛋白质生物合成具列特征( A B C E )
A氨基酸必须活化 B需消耗量 C延长氨基酸必须进位转肽移位税落四步骤 D合成肽链C端N端断延长 E新生肽链需加工成活性蛋白质
15．列容属蛋白质合成加工修饰( B C D E )
A切含子连接外显子 B切信号肽 C切N端Met
D形成二硫键 E氨侧链修饰
16．蛋白质生物合成程中列步骤需消耗量( A B C E )
A氨基酸分子活化 B70S起始复合物形成 C氨酰tRNA进入核糖体A位 D肽键形成 E核糖体移位
17．原核生物肽链延伸程列物质参( A B C E )
A肽基转移酶 B鸟苷三磷酸 CmRNA D甲酰甲硫氨酰tRNA EEFTuEFTs EFG
18ShineDalgarno序(SD序)指： ( A )
AmRNA分子起始码游813核苷酸处序
BDNA分子转录起始点前813核苷酸处序
C16srRNA3＇端富含嘧啶互补序 D启动基序特征 E正确
19 研究蛋白合成中利嘌呤霉素： ( B )
A亚基解聚 B肽链提前释放 C抑制氨基酰tRNA合成酶活性 D防止核糖体形成 E正确
20 氨基酸活化酶：( D )
A活化氨基酸氨基 B利GTP作活化氨基酸量源
C催化tRNA5’磷酸相应氨基酸间形成酯键
D种酶特异作种氨基酸相应tRNA E正确
21核糖体制造D工厂
A 核酸 B 糖类 C 纤维素 D 蛋白质
22mRNAB连续核苷酸决定特定氨基酸
A 2 B 3 C 4 D 5
23部分原核生物起始密码子D
A GUA B UAG C AGU D AUG
24核糖体包含两种成分A
A 蛋白质rRNA B DNARNA
C 糖rRNA D DNA蛋白质
25携带氨基酸相B组tRNA称功tRNA
A 密码子 B 反密码子 C 终止子 D 含子
26真核生物中核糖体亚基60S 亚基40S 整核糖体A
A 80S B 100S C 70S D 50S
27．终止密码子UAAUAGUGA说： C
A．氨酰tRNA仅识UAA B．氨酰tRNA仅识UAG
C．氨酰tRNA识终止密码子 D．氨酰tRNA均识
E．氨酰tRNA仅识UGA
28原核生物mRNA起始密码子AUG游813核苷酸段受核糖体结合保护富含嘌呤39核苷酸序列般5’AGGAGGU3’ 称A序列
A SD B Hogness D sextama D pribnow
29细菌蛋白质合成起始子D
A EFGEFTsEFTu B eIF1eIF2eIF3
C eEFGeEFTseEFTu D IF1 IF2 IF3
30氨酰基tRNA进入核糖体A位点肽链形成关键B
AGTP存 BGTP水解 CATP存 DATP水解
五问答题
1．参蛋白质生物合成体系组分具什功
①mRNA：蛋白质合成模板
②tRNA：蛋白质合成氨基酸运载工具
③核糖体：蛋白质合成场
④辅助子：
(a)起始子—参蛋白质合成起始复合物形成
(b)延长子—肽链延伸作
(c)释放子终止肽链合成核糖体释放出
2．遗传密码破译
(1) 体外细胞蛋白质合成体系中加入工合成polyＵ 开创破译遗传密码先河
(2) 混合聚物(mixed copolymers)实验密码子中碱基组成测定
(3) aatRNA确定三核苷酸序列(密码子)结合
3．遗传密码什特点
(1)密码标点：起始密码始终止密码止需连续阅读中断增加删某核苷酸会发生移码突变 (2)密码重叠：组成密码三核苷酸代表氨基酸次重叠
(3)密码简性：密码子表中MetTrp应密码外余氨基酸均两密码保持生物遗传稳定性具重意义
(4)变偶假说：密码专性头两位碱基决定第三位碱基重性反密码子相互作中具定灵活性
(5)通性例外：球切生物套遗传密码年已发现某例外现象某哺乳动物线粒体中UGA终止密码色氨酸密码子
(6)起始密码子AUG时代表Met终止密码子UAAUAGUGA频率
4．简述三种RNA蛋白质生物合成中作
(1)mRNA：DNA遗传信息通转录作传递mRNAmRNA作蛋白质合成模板传递遗传信息指导蛋白质合成
(2)tRNA：蛋白质合成中氨基酸运载工具tRNA反密码子mRNA密码子相互作分子中遗传信息转换成蛋白质氨基酸序遗传信息转换器
(3)rRNA 核糖体组分形成核糖体结构功起重作核糖体中蛋白质辅助子起提供翻译程需全部酶活性
5．氨基酸蛋白质合成程中样活化
催化氨基酸活化酶称氨酰tRNA合成酶形成氨酰tRNA反应分两步进行：
(1)活化 需Mg2+Mn2+ATP供合成酶催化生成氨基酸AMP酶复合物
(2)转移 合成酶催化氨基酸氨基酸—AMP—酶复合物转移相应tRNA形成氨酰tRNA
6．简述蛋白质生物合成程
(1)氨基酸活化：游离氨基酸必须活化获量参蛋白质合成氨酰tRNA合成酶催化消耗1分子ATP形成氨酰tRNA
(2)肽链合成起始：起始子参mRNA30S亚基50S亚基起始甲酰甲硫氨酰tRNA(fMettRNAt)形成70S起始复合物整程需GTP水解提供量
(3)肽链延长：起始复合物形成肽链开始延长首先氨酰tRNA结合核糖体A位然肽酰转移酶催化P位起始氨基酸肽酰基形成肽键tRNAf空载tRNA留P位．核糖体mRNA5’→3’方移动密码子距离A位延长氨基酸单位肽酰tRNA转移P位全部程需延伸子EFTuEFTs量GTP提供
(4)肽链合成终止核糖体移终止密码UAAUAGUGA时终止子RF1RF2识终止密码肽酰转移酶活性转水解作P位肽酰tRNA水解释放肽链合成终止
7．蛋白质合成中保证翻译正确性
(1)氨基酸tRNA专结合保证tRNA携带正确氨基酸
(2)携带氨基酸tRNAmRNA识mRNA密码子tRNA反密码子相互识保证遗传信息准确误转译
(3)起始子延长子作起始子保证起始氨酰tRNA进入核糖体P位起始密码子结合延伸子高度专性保证起始tRNA携带fMet进入肽链部
(4)核糖体三位点模型E位A位相互影响防止正确氨酰tRNA进入A位提高翻译正确性
(5)校正作：氨酰tRNA合成酶tRNA校正作占核糖体A位氨酰tRNA校变异校基校基间校等种校正作保证翻译正确
8．原核细胞真核细胞合成蛋白质起始程什区
(1)起始子：原核IF1IF2IF2真核起始子达十种
(2)起始氨酰tRNA：原核fMettRNAf真核MettRNAi
(3)核糖体：原核70S核粒体分30S50S两种亚基真核80S核糖体分40S60S两种亚基
9．蛋白质合成加工修饰容
(1)水解修饰
(2)肽键中氨基酸残基侧链修饰
(3)二硫键形成
(4)辅基连接亚基聚合
10．真核细胞原核细胞核糖体组成什证明核糖体蛋白质合成场
原核细胞：70S核糖体30S50S两亚基组成
真核细胞：80S核糖体40S60S两亚基组成
利放射性位素标记法通核糖体分离证明
11 已知种突变噬菌体蛋白单核苷酸插入引起移码突变正常蛋白质突变体蛋白质胰蛋白酶消化进行指纹图分析结果发现肽段差异测基酸序： 正常肽段 MetValCysValArg
突变体肽段 MetAlaMetArg
（1）什核苷酸插入什方导致氨基酸序改变？
（2）推导出编码正常肽段突变体肽段核苷酸序列
提示：关氨基酸简密码分
Val： GUU GUC GUA GUG Arg： CGU CGC CGA CG AGA AGG
Cys： UGU UGC Ala： GCU GCC GCA CGC
(1)正常肽段第Val密码GUAG插入C (2) 正常肽段核苷酸序列：AUG GUA UGC GU… CG…突变体肽段核苷酸序列：AUG GCU AUG CGU
12 试较原核生物真核生物翻译
原核生物真核生物翻译较：仅述真核生物原核生物相反
（1）起始Met需甲酰化
（2）SD序列需扫描程
（3）tRNA先mRNA核糖体亚基结合
（4）起始子较
（5）终止释放子
第六章
名词解释
1式作组件 具调节功特定DNA序列影响分子中相关基表达位受调控DNA编码区段游基表达调控关式作元件启动子增强子沉默子
2反式作子 指直接间接识结合类式作元件核心序列参调控靶基转录效率蛋白质发生突变时影响染色体等位基表达
3结构基 决定合成某种蛋白质分子结构相应段DNA结构基功携带遗传信息转录mRNA（信核糖核酸）mRNA模板合成具特定氨基酸序列蛋白质
4调节基 调节蛋白质合成基结构基需某种酶时合成某种酶需时停止合成染色体结构基调节作
5操基 位结构基端操结构基基操作基开动时处染色体控制结构基开始转录翻译合成蛋白质关闭时结构基停止转录翻译操作基系列受操结构基合起形成操子
6阻遏蛋白 阻遏蛋白基某种调节基制成种控制蛋白质原核生物中具抑制特定基（群）产生特征蛋白质作
7操子 指包含结构基操基启动基相邻基组成DNA片段中结构基表达受操基调控
8辅阻遏物 阻遏系统中产生阻遏作分子物质做辅阻遏物
9组成型表达 指生物生命全程中体细胞类型中均持续表达少受环境素影响基通常称家基
10诱导型表达 指某基表达极易受环境变化影响特定环境信号刺激基表达开放增强基表达关闭降
11IPTG效应物 异丙基βD硫代半乳糖苷β–半乳糖苷酶活性诱导物质常蓝白斑筛选
12CAP 环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ）cAMPCRP结合形成复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）
13cAMPCAP 操子cAMPCAP调节cAMPCAP复合物阻遏物正调控子
14反子 mRNA分子编码肽链肽链应DNA片断位转录单位享起点终点
15单反子 真核基转录产物单反子种基编码种肽链RNA链基转录调节元件
16Attenuator弱化子 trp操子mRNA合成起始非培养基中完全没色氨酸转录总仅产生—140核苷酸RNA分子终止区域称衰减子弱化子
17游启动子元件 TATA框游保守序列称游启动子元件游激活序列
二填空题
1．启动子中元件通常分两种：核心启动子元件游启动子元件
2 表达正调控系统中加入调节蛋白基表达活性开启种调节蛋白称辅基诱导蛋白负调控系统中加入调节蛋白基表达活性关闭种调节蛋白称阻遏蛋白
3 糖细菌双重作方面作碳源供细胞生长方面细胞壁成分需赖cAMP—CRP启动子S2进行底水永久型合成时需赖cAMP—CRP启动子S1高水合成进行调节G时转录S2开始G时转录S1开始
三选择题
1果没D存时基表达加入种D基活性关闭种控制系统做负调控系统
A 结构基 B 启动子 C 操基 D 调节蛋白质
2cAMP受体蛋白D
A ATP B ADP C UTP D CAP
3终产物RNA基进行AA处理完成基表达全程
A 转录…………转录 B 转录…………翻译
C 复制…………转录 D 复制…………翻译
四非题
1操子细菌基调控表达完整单元 （ × ）
2 细菌中衰减子作方式翻译手段控制转录 （ √ ）
五简答题
1乳糖操子作机制？
⑴乳糖操子组成：肠杆菌乳糖操子含ZYA三结构基分编码半乳糖苷酶透酶半乳糖苷乙酰转移酶外操序列O启动子P调节基I
⑵阻遏蛋白负性调节：没乳糖存时I基编码阻遏蛋白结合操序列O处乳糖操子处阻遏状态合成分解乳糖三种酶乳糖存时乳糖作诱导物诱导阻遏蛋白变构结合操序列乳糖操子诱导开放合成分解乳糖三种酶乳糖操子种调控机制诱导负调控
⑶CAP正性调节：启动子游CAP结合位点肠杆菌葡萄糖碳源环境转变乳糖碳源环境时cAMP浓度升高CAP结合CAP发生变构CAP结合乳糖操子启动序列附CAP结合位点激活RNA聚合酶活性促进结构基转录调节蛋白结合操子促进结构基转录乳糖操子实行正调控加速合成分解乳糖三种酶
⑷协调调节：乳糖操子中I基编码阻遏蛋白负调控CAP正调控两种机制互相协调互相制约
2正调控负调控什？
负调控时调节基蛋白质产物基活性种阻遏物正调控时调节基产物种激活物
3区(1)启动子增效突变启动子减效突变(2)游序列游序列
(1)启动子部突变会增强降低转录水
(2)启动子关游序列转录．方致游序列转录方相反
4三序列原核生物mRNA精确转录必少
⑴启动子（Promotor）启动子序列10bp35bp处 两6核苷酸组成序列（consensus sequence）区段碱基命名10区35区许启动子10区核苷酸序列相似TATAAT称TATA boxPribnow框RNA Pol牢固结合位点简称结合位点35区部分启动子TTGACA序列RNA Polσ亚基识位点称Sextama框
⑵编码序列指导mRNA合成
⑶终止子功RNA合成停止终止点位置RNA Pol停止RNA释放mRNA
5葡萄糖影响涉糖代谢操子(葡萄糖敏感型操子)表达
缺乏葡萄糖时cAMP水升高CAP蛋白葡萄糖敏感操子中启动子 CAP 位 点结合转录作协起始果葡萄糖cAMP．水降CAP蛋白结合转录速率协降
6 简述乳糖操子正负调控机制
⑴阻遏蛋白负调控
①细胞诱导物时诱导物结合阻遏蛋白刻聚合酶启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操子结构基
②诱导物时阻遏蛋白结合启动子蛋白质部分重叠转录
⑵CAP正调控
①细胞缺少葡萄糖时ATP→CAMP结合CRP生成CAPCAP位点结合增前RNA聚合酶转录活性
②葡萄糖存时CAMP分解合成少CAP启动子CAP位点结合RNA聚合酶操区结合法起始转录结构基表达降
7 激活蛋白（CAP）转录正调控作？
环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein）cAMPCRP结合形成复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）肠杆菌生长缺乏葡萄糖培养基中时CAP合成量增加CAP具激活乳糖（Lac）等启动子功赖CRP启动子缺乏般启动子具典型35区序列特征（TTGACA）RNA聚合酶难结合
CAP存（功）：显著提高酶启动子结合常数表现二方面：
①CAP通改变启动子构象酶相互作帮助酶分子正确定便10区结合起取代35区功作
②CAP抑制RNA聚合酶DNA中位点结合提高特定启动子结合概率
8 简述衰减子作机理
肠杆菌中衰减作赖转录翻译紧密偶联RNA聚合酶刚转录出前导肽部分密码子核糖体开始翻译细胞中色氨酸时核糖体够利翻译出整前导肽终止密码子ＵＧＡ（＋７０）处停时核糖体占序列１部分序列２序列２序列３配序列３４配产生终止子发夹结构实现转录终止出现色氨酸饥饿时核糖体停顿两trp密码子时核糖体占序列１留完整序列２便转录出转录出序列３形成二级结构样序列４转录出单链状态终止子形成转录继续
9lacZlacY突变体生长含乳糖培养基时lac操子中剩余基没诱导解释原
异乳糖乳糖操子天然诱导物乳糖末诱导细胞中少量 β半乳糖苷酶代谢产生 lac突变中完全存 β半乳糖苷酶乳糖代谢 lacZ中完全没透性酶乳糖进入细胞样两种突变体中产生异乳糖操子中余基培养基中乳糖诱导表达基 IPTG样安慰诱导物诱导 IPTG作诱导物需透性酶帮助进入细胞
10衰减作调控Ecoli中色氨酸操子表达
衰减作根 tRNATrp数量调节 Trp操子表达 tRNATrp数量取决细胞中 Trp水Trp操子 mRNA前导序列长包括编码长 14氨基酸肽需全部遗传信息(包括 AUG起始密码 UGA 终止密码)肽含两相邻 Trp残基色氨酰tRNA前导肽翻译必少衰减作发生必条件：(1)翻译产生前导肽(2)转录翻译偶联样 RNA聚合酶转录前导序列时核糖体紧接着结合新生 mRNA翻译产生前导肽mRNA 前导序列包括两相似反重复序列序列 2序列 1 3部分互补 样 1+2 2+3 3+4 1+2 3+4 通碱基配形成茎环结构 序列 3 4 配形成茎环结构 Trp操子终止子基相终止子样 茎 3’侧具 7 连续 U 形成尾巴形成种衰减子结构时终止子样转录终止注意两 Trp密码位序列 1 前导肽终止密码序列 l 2间样果色氨酸量充足tRNATrp含量够前导肽翻译进行终止密码 UGA 结合核糖体覆盖 l 2两区域样 1 22 3 两序列形成茎环结构 34两序列形成衰减子环起终止子作导致 RNA聚合酶分子脱离 DNA模板方面果色氨酸缺乏存色氨酰tRNA少导致核糖体停止两 Trp密码前样核糖体仅盖住区域 l序列 4 转录前序列 2 序列 3 形成茎环结构结构形成阻止序列 3 序列 4形成终止子结构出现通读切操子部分继续转录事实 mRNA 核糖体位置决定mRNA 二级结构衰减作否发生
12举例说明原核生物基表达调控机理
Ecoli 乳糖操子中结构基lacZlacylacA三基离编码βD半乳糖苷酶βD半乳糖苷透性酶βD半乳糖苷转乙酰酶调节基lacI编码阻遏蛋白启动子lacP操基lacO负调控：细胞引诱物时阻遏蛋白够操基联合操基启动子定程度重叠妨碍RNA聚合酶10序列形成开放性启动子复合物细胞引诱物存时引诱物极高浓度阻遏蛋白快速联合改变阻遏蛋白构象快速操基解离样RNA聚合酶启动子牢固联合形成开放性启动子复合物开始转录lacZYA结构基正调控：cAMPCAP复合物乳糖操子正调控子乳糖启动子两CAP联合位点7050（位点I）50D40（位点II）位点I包含逆反复序列彷佛数强联合位点特征位点II弱联合位点cAMPCAP复合物联合位点I时位点II联合cAMPCAP复合物力显著提高旦位点II占领RNA聚合酶快35序列联合然10序列联合
13预测具列突变λ噬菌体感染细菌表型说明原：（1）产生抗蛋白酶λCII蛋白突变（2）具阻止蛋白结合结合λOR2突变（3）λ基失作突变（4）编码λCI蛋白基突变
(1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)λ噬菌体感染程中N蛋白(PL左侧表达)基表达N基游终止前生理功正常抗终止导致ccro基游表达cⅡ蛋白合成λcⅡ蛋白突变体具蛋白酶抗性活性辞感染细胞状态(健康病态)cⅡ蛋白维持cⅡ蛋白整合导致高浓度cⅡ蛋白助PREP1启动子转录cI蛋白(阻抑蛋白)cro反义RNA整合酶(λ噬菌体整合需)合成阻抑蛋白占0ROL操基通调节促进身合成(PRM表达)防止更N蛋白Cro蛋白合成
(2)够阻止蛋白质结合0R2突变体会导致裂解0R2搬突变体够防止Cro蛋白阻抑蛋白结合cro基表达需诱导物高水表达 Cro蛋白OR3进行非协结合种结合阻抑基表达需身产物诱导形成阻抑蛋白Cro终会关闭早期基表达通诱导PQ开始表达诱发中期期基表达综述Cro会摆脱阻抑蛋白影响
(3)失活λN基突变令导致灭活降解N基产物抗终止子N cro基外基表达需结果量缺陷N蛋白Cro蛋白合成噬菌体进入溶源状态进入裂解途径DNA终降解
(4)编码cI蛋白基发生突变时会导致快速裂解产生没功阻抑蛋白0ROL操基结合没竞争Cro会摆脱阻抑蛋白影响
第七章
名词解释
1增强子 指增加连锁基转录频率DNA序列增强子通启动子增加转录效增强子位基5’端位基3’端位基含子中
2基扩增 细胞选择性复制DNA 产生量拷贝
3基重排 通基转座DNA断裂错接正常基序发生改变
4基序 DNA蛋白质等生物分子中保守序列
5沉默子 基表达负调控种元件结合特异蛋白子时基转录起阻遏作
6绝缘子 长约百核苷酸通常位启动子正调控元件(增强子)负调控子(异染色质)间种调控序列绝缘子身基表达没正效应没负效应作调控元件基活化效应失活效应发生作
7DNA结合结构域 肽链蛋白分子中结合DNA结构区域通DNA结合发挥作（eg调控基表达）
8源异型盒 简称源框源异型基中段高度保守DNA序列源框180碱基组成序列编码60氨基酸源框普遍存果蝇鼠蛙等生物中
9断裂基 基编码序干非编码区域（间隔序列）隔开阅读框连续种基称隔裂基
10应答元件 位基游转录子识结合调控基专性表达DNA序列
11螺旋环螺旋基序 2α螺旋间隔非螺旋环(loop)组成．原癌基产物Cmyc结合蛋白Max．
12螺旋转角螺旋基序 两段螺旋短转角结构分开中段螺旋DNA识螺旋
13bZIP蛋白 蛋白亮氨酸拉链附存碱性结构域蛋白
14锌指结构 肽链保守序列中组氨酸加半胱氨酸(His2／Cys2)2半胱氨酸(cys2／cys2)锌离子形成配位键氨基酸间肤链成环状突出折迭成指形结构指结构常串联重复锌指族转录子二聚体形式DNA式调控元件结合
15游启动子元件 TATA框游保守序列称游启动子元件游激活序列
16Gene expression 指基转录RNA翻译蛋白质程表达产物包括mRNAtRNArRNA蛋白质肽
17RNAi RNA干扰（RNA interference RNAi）指进化程中高度保守双链RNA（doublestranded RNAdsRNA）诱发源mRNA高效特异性降解现象
二填空题
1 通基重排调节基活性典型例子免疫球蛋白结构基表达
2．哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见元件TATAGCCAAT应反式作蛋白子分TFIIDSP1CTFNF1
3．RNA聚合酶Ⅱ基转录子TFⅡATFⅡBTFIIDTFⅡE结合序：DABE
中TFIID功TATA盒结合
4．DNA结合转录子二聚体形式起作转录子DNA结合功域常见种螺旋转角螺旋锌指模体碱性亮氨酸拉链模体
5 典型锌指蛋白C2H2型Zn离子两Cys残基两His残基形成配位键类锌指蛋白C2C2型Zn离子四Cys残基形成配位键
三选择题
1 真核基表达调控中促进转录速率调控元件：B
A衰减子 B增强子 Crepressor DTATA box
2 述遗传信息流动程中生物分子参C
A复制 B转录 C翻译 D三者差
3．真核生物DNA中约27胞嘧啶存甲基化修饰绝数甲基化发生C二核苷酸
A．CC B CT C CG D CA
五简答题
1简述真核生物转录水调控机制？
真核生物转录水调控通反式作子式作元件RNA聚合酶相互作完成反式作子结合式作元件影响转录起始复合物形成程A转录起始复合物形成：真核生物RNA聚合酶识通转录子DNA形成蛋白质DNA复合物转录子结合DNA形成功启动子RNA聚合酶识结合转录起始复合物形成程：TFⅡD结合TATA盒RNA聚合酶识结合TFⅡDDNA复合物形成闭合复合物转录子RNA聚合酶结合形成开放复合物程中反式作子作：促进抑制TFⅡDTATA盒结合促进抑制RNA聚合酶TFⅡDDNA复合物结合促进抑制转录起始复合物形成B反式作子：般具三功域（DNA识结合域转录活性域结合蛋白结合域）识结合游调控区中式作元件基表达正性负性调控作3转录起始调控：⑴反式作子活性调节：A表达式调节——反式作子合成出具活性B价修饰——磷酸化磷酸化糖基化C配体结合——许激素受体反式作子D蛋白质蛋白质相互作——蛋白质蛋白质复合物解离形成⑵反式作子式作元件结合：反式作子激活识结合游启动子元件增强子中保守性序列基转录起调节作⑶反式作子作方式——成环扭曲滑动Oozing⑷反式作子组合式调控作：种反式作子结合式作元件然发挥促进抑制作反式作子基调控单子完成种子组合发挥特定作
2简述真核生物转录水调控机制？
⑴5端加帽3端聚腺苷酸化调控意义：5端加帽3端聚腺苷酸化保持mRNA稳定重素少保证mRNA转录程中降解
⑵mRNA选择性剪接基表达调控作
⑶mRNA运输控制
3cAMP信号转导途径？
1组成：胞外信息分子（胰高血糖素肾腺素促肾腺皮质激素）受体G蛋白ACcAMP PKA2途径：
v 信号分子受体结合引起受体构象变化
v 受体活化G蛋白
v 活化G蛋白激活腺苷酸环化酶（AC）
v AC催化ATP生成cAMP
v cAMP活化PKAPKA目标蛋白磷酸化调节代谢酶活性调节基表达
4什mRNA翻译起始密码子游必须含翻译核苷酸？
原核生物mRNA起始密码子(AUG)附（5＇方游）段长短等序含较嘌呤核苷酸称SD序核糖体亚基16SrRNA3＇端富含嘧啶核苷酸区域配结合助带甲酰甲硫氨酸起始tRNA识mRNA起始密码(AUG)肽链合成开始原核mRNA相似真核mRNA5＇端翻译区（前导序）中常段序核糖体亚基18SrRNA3＇端段序互补结合种结合真核mRNA翻译启动关
5原核生物真核生物启动子差？
原核生物
TTGACA TATAAT起始位点
35 10
真核生物
增强子GC CAATTATAA—5mGpp—起始位点
110 70 25
6较原核生物真核生物基组结构异指出真核生物细胞RNA含子剪接方式
答案点：重复序列情况含子外显子方面述剪接方式指GUAG AUAC类含子间接错误未找引源错误未找引源类含子间接方式
7较原核生物真核生物基表达调控异点
点两者转录水进行调控点原核生物转录翻译偶联操子调控现象普遍真核生物基表达复杂转录翻译分开转录细胞核进入细胞质调控较复杂DNA水转录水翻译水均存
8简述真核基表达调控中结合部位调控蛋白质间相互作方式
基游启动子元件组成转录子结合转录子通基础转录复合体作影响转录效率现已发现许转录子现象：DNA序列蛋白子识直接结合DNA序列蛋白子少数蛋白子间相互作数转录子通蛋白质－蛋白质间作DNA序列联系影响转录效率转录子间转录子DNA结合会引起构象变化影响转录效率
作蛋白质转录子功分析结构包含区域：
1）DNA结合域(DNA binding domain)60－100氨基酸残基组织亚区组成
2）转录激活域(activating domain)常30－100氨基酸残基组成结构域富含酸性氨基酸富含谷氨酰胺富含脯氨酸等种类酸性结构域见
3）连接区连接两结构域部分DNA直接结合转录子没DNA结合域通转录激活域直接间接作转录复合体影响转录效率
DNA结合转录子二聚体形式起作DNA结合功域常见种：
1）螺旋转角螺旋(helixturnhelix HTH)螺旋环螺旋(helixloophelixHLH) 类结构少两α螺旋间短肽段形成转角环连接两样motif结构二聚体形式相连距离正相DNA螺距(34nm)两α螺旋刚分嵌入DNA深沟
2）锌指(zinc finger) 结构图示重复指状结构约含23氨基酸残基锌4配价键4半胱氨酸2半胱氨酸2组氨酸相结合整蛋白质分子20样锌指重复单位单位指部伸入DNA双螺旋深沟接触5核苷酸例GC盒结合转录子SP1中连续3锌指重复结构
3）碱性－亮氨酸拉链(basic leucine zipper bZIP)该结构特点蛋白质分子肽链隔6氨基酸亮氨酸残基结果导致亮氨酸残基α螺旋方出现
两相结构两排亮氨酸残基疏水键结合成二聚体该二聚体端肽段富含碱性氨基酸残基正电荷DNA双螺旋链带负电荷磷酸基团结合形成二聚体DNA亲结合力明显降低肝脏肠皮脂肪细胞某脑细胞中称CEBP家族类蛋白质够CAAT盒病毒增强子结合特征形成bZIP二聚体结构
述见：转录调控实质蛋白质DNA蛋白质蛋白质间相互作构象变化正蛋白质核酸活表现生物分子间辨认相互作结构变化生命活动中意义认识研究起步阶段中许容甚重规律知努力探索
9．什说转录激活基表达调控基环节？
基表达级水调控中转录起始基表达调控限速步骤转录激活调节步骤特异性强涉面广包括DNA序列调节蛋白DNA蛋白质蛋白质蛋白质间相互作述素RNA聚合酶活性影响等
10．什真核生物中转录翻译法偶联？
真核生物转录发生细胞核翻译发生细胞质外转录初级产物需步加工进行翻译
11．反式作子DNA结合结构域结构模式种分写出结构特点
1)锌指结构
2)源结构域具螺旋回折螺旋结构
3)亮氨酸拉链结构两单体结合形成DNA结合域
4)螺旋环螺旋结构易形成二聚体螺旋区形成反式作子二聚体碱性氨基酸区结合DNA
5)碱性α螺旋含较碱性氨基酸转录复制子CTFNF1DNA结合区域具碱性α螺旋结构 含高密度碱性氨基酸锌指结构源结构域亮氨酸拉链结构
6）β折叠
12 型真核基结构
①编码序列—外显子
②插入外显子间非编码序列—含子
③5＇端3＇端非翻译区
④调控序列(位述三种序列中)
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绪
思考题：（P9）
1 广义狭义写出分子生物学定义？
广义讲分子生物学包括蛋白质核酸等生物分子结构功研究分子水阐明生命现象生物学规律
狭义概念分子生物学范畴偏重核酸（基）分子生物学研究基DNA结构功复制转录表达调节控制等程中涉程相关蛋白质酶结构功研究
2现代分子生物学研究容方面？什反生物学？什基组时代？
研究容： DNA复制转录翻译基表达调控研究DNA重组技术结构分子生物学
反生物学：指利重组DNA技术离体定诱变方法研究已知结构基相应功体外基突变导入体检测突变遗传效应表型探索基结构
基组时代：研究细胞全部基表达图式全部蛋白质图式类基组研究结构功转移
3写出三分子生物写学展事件（年代发明者简容）
1953年WatsonClick发表脱氧核糖核苷酸结构著名文提出DNA双螺旋结构模型
1972~1973年重组DNA时代HBoyerPBerg等发展重组DNA技术完成第细菌基克隆开创基工程新纪元
1990~2003年美日英法俄中六国完成类基组计划解读类遗传密码
421世纪分子生物学发展趋势样？
着基组计划完成类已掌握模式生物遗传密码迎基组时代类基组研究重点结构功转移相关学说理相应诞生功基组学蛋白质组学生物信息学生命科学进入全新时代
第四章
思考题：（P130）
1 基概念？基研究分发展阶段？
概念：基原核真核生物病毒DNARNA分子中具遗传效应核苷酸序列遗传基单位突变单位控制形状功单位
发展阶段：20世纪50年代前细胞染色体水进行研究属基染色体遗传学阶段
20世纪50年代DNA分子水进行研究属分子生物学阶段
20年直接克隆目基出发研究基功表型间关系反生物学阶段
5什C值C值矛盾？表现？
C值：真核生物单倍体基组包含全部DNA量成该物种C值
C值矛盾（悖理）：指真核生物中DNA含量反常现象
表现：C值生物进化程度复杂性增加
关系密切生物C值相差甚
真生物DNA量远远编码蛋白质等物质需量
6断裂基外显子含子概念什？关系？
断裂基：基部插入编码序列完整基分隔成连续干区段样基做连续基断裂基
外显子：真核生物连续基中编码功区段称外显子
含子：编码功区段称含子
关系：真核生物基组中连续基存种组织表达表达序列保持变部外显子含子数目位置长度变
含子外显子间连接位点：保守序列序列源性互补性
7重叠基初什生物中发现？重叠基存意义？
&X174噬菌体
重叠基存意义：提高基利率
8分写出病毒原核真核生物基组概念请较特点异
病毒基组：病毒中含整套基包括构成基基间区域DNA
基组特点：细菌相较病毒基组含遗传信息少编辑少数蛋白质
基组DNARNA组成种病毒含种核酸核酸结构单链双链闭合环状线状分子
病毒基组通常重叠重叠基核苷酸序列转录mRNA读框基相读框起始密码子终止密码子
病毒基组部分序列编码蛋白质基间间隔序列非常短非编码区占部分
病毒基组中功相关基般集中成簇特定部位构成相功单元转录单元转录产物般反子mRNA加工成蛋白质mRNA
噬菌体基连续
原核生物基组：原核生物染色体质粒中含整套基
特点：基通常仅条环形线形双链DNA分子组成
复制起始点
操子结构数相关结构基串联起受统调控区调节合成反子mRNA
编码蛋白质结构基单拷贝rRNA基般拷贝
非编码DNA占例少类似病毒基
基组DNA具种调控区复制起始区复制终止区转录启动子转录终止区等特殊序列重复序列病毒基组复杂
真核生物基类似具移动DNA序列组分
真核生物基组：真核生物单倍染色体组细胞器中含整套基
特点：真核基组分子质量相复杂度
线状染色体条染色体复制起点
细胞核DNA蛋白质稳定结合形成染色质复杂高级结构
基表达中转录翻译时间空间分隔偶联
量重复序列单位长度重复程度异
基般点拷贝形式存转录产物单反子mRNA
存着移动DNA序列
绝数真核生物基含含子基编码区连续排列
异：红色标记相点绿色点
9简叙述真核生物DNA序列种类型
单拷贝DNA序列
低度重复DNA序列2~10拷贝数
中度重复DNA序列十数十万拷贝数
高度重复DNA重复次数万数百次
10含子什功？存意义？
促进重组
增加基组复杂性
含读框
基组中外显子含子相含子具编码序列产生蛋白质功RNA
含部分剪接信号
产生核仁RNA
含子基表达影响
存意义：利变异进化增加重组机率提高进化率
14类基组研究容？研究类基组重意义？
研究容：类全基组作图染色体作图（包括遗传连锁作图物理作图）基组进行标记划分基特定DNA序列染色体位置提供标志进步包括绘制转录图谱
基组DNA进行裂解切割基克隆百甚千碱基长度DNA片段已知标识进行序排列
测定基组全部DNA序列全部DNA进行序列分析染色体位置进行排列染色体DNA序列全部
基鉴定确定基结构分离鉴定具重功重疾病相关基
建立基信息系统基信息储存处理开发相应软件
重意义：
16什功基组学？基芯片？蛋白质组学？生物信息学？
功基组学：指利结构基组学提供信息规模实验方法统计计算分析全面系统分析全部基功学科
基芯片： 利原位合成法已合成系列寡核苷酸探针分子预先设定排列方式固定固相支持界面表面（硅片玻片尼龙膜等）形成形成高密度寡核苷酸阵列样品进行杂交通检测杂交信号强度分布进行分析
蛋白质组学：指研究某基组某特定细胞特定时间表达全部蛋白质集合体蛋白修饰种形态
生物信息学：
17分子生物学信息数库4类？
基组数库
核算蛋白质级结构序列数库
生物分子三围构象数库
三类数库文献资料基础构建二次数库
18名词解释：基家族 基簇 假基 HGP STS SAGE BAC YAC ORF
基家族：真核生物基生物基组中源相结构相似功相关组基
基簇：基家族中成员紧密成簇排列成段串联重复单位定位染色体特殊区域属祖先基扩增产物基簇中包含没生物功假基通常基簇序列源性基族间序列源性
假基：基家族中成员DNA序列结构功基相似表达产生功基产物基称假基
HGP Human genome project 类基组计划
STS Sequencetagged site 序列标签位点段300~500bp已知序列染色体定位置
SAGE serial analysis of gene expression 基表达系统分析 原理cDNA3端段9~11bp短序列包含代表该转录足够信息够区分该基组中95﹪基段特定序列称SAGE标签显示代表基否表达表达程度
BAC bacterial artificial chromosome 细菌工染色体
YAC yeast artificial chromosome酵母工染色体
ORF读框
第六章 DNA损伤修复基突变
思考题：（P186）
1 什DNA损伤？DNA结构改变两种类型？危害？
DNA损伤指生物体生命程中DNA双螺旋结构发生改变
DNA结构发生改变两种类型：单基改变双螺旋结构异常扭曲
危害：单碱基改变影响DNA序列影响整体构象DNA双螺旋分开时影响转录复制程通序列变化改变子代遗传信息
双螺旋结构异常扭曲DNA复制转录产生生理性伤害
2 DNA分子碱基发性化学改变造成种损伤？
互变异构移位
脱氨基作
DNA聚合酶滑
活性氧引起诱变
碱基丢失
3 化学素引起DNA损伤种？写出点？
烷化剂DNA损伤：烷化剂类亲电子化合物容易生物体中分子亲核位点起反应碱基烷基化碱基脱落断裂交联（具体见课件）
碱基类似物DNA损伤：工合成碱基类似物作促突变剂抗癌药物5溴尿嘧啶（5BU）5氟尿嘧啶（5FU）2氨基腺嘌呤（2AP）等
4 什事DNA修复？细胞DNA损伤种修复系统什？
DNA修复： 指针已发生缺陷进行补救机制指生物体细胞长期进化程中形成种保护功
修复系统： 切修复（excision repair）：碱基切修复核苷酸片段切修复
错配修复：（mismatch repair）校正活性漏校碱基复制保真性提高100～1000倍
直接修复：(direct repair)损伤碱基回复原状态种修复
重组修复：(recombination repair)机体细胞复制起始时尚未修复DNA损伤部位先复制修复种方式~
易错修复 (error prone repair) SOS反应诱导修复系统中易产生差错修复易产生差错修复SOS反应诱导产生缺乏校功DNA聚合酶DNA链损伤部位出现配碱基复制继续进行增加细胞存活机会时程带高突变率
5 什SOS反应？SOS反应什物质引起？意义？
SOS反应：许造成DNA损伤抑制DNA修复程引起系列复杂诱导效 应种诱导效应称应急效应（SOS response）
引起物：SOS反应RecA蛋白LexA阻遏物相互作引起
意义：DNA修复
导致变异
DNA复制受阻碍情况避免细胞分裂产生含DNA细胞者细胞更重组修复机会
6 基突变概念？简写明基突变种类型什突变热点？
基突变：基遗传物质发生遗传结构数量变化通常产生定表型
类型：碱基换（点突变）：DNA错配碱基复制固定原碱基碱基取代包括转换（嘌嘌嘧嘧）颠换（嘌嘧嘧嘌）两种类型
插入突变：基序列中插入碱基段外DNA导致突变两种方式：拷贝复制移动指位点序列复制插入令位点非拷贝移换DNA序列位点直接移动位点
义突变：基突变改变密码子组成密码子简性未改变编码氨基酸突变称声突变中性突变
错义突变：基突变改变编码氨基酸种类位置突变程度影响蛋白质酶活性
义突变：基突变氨基酸密码子变成终止密码子时导致翻译提前结束
移码突变：非三正倍数核苷酸插入缺失导致编码区该位点三联体密码子读框改变错误氨基酸发生错误基产物完全失活
缺失突变：指碱基段DNA序列中删较长核苷酸序列丢失引起突变种突变难回复
渗漏突变：突变基产物尚部分活性错义突变表型介野生型完全突变型间某种状态
回复突变：突变体恢复原野生型突变程
突变热点：DNA分子意位点发生频率相等某位点发生突变频率远远高均数称突变热点
7 导致DNA分子发生诱变诱变剂？
碱基类似物
碱基修饰剂
嵌入染料
紫外线电离辐射
8 名词解释：
MRS SSB MEC
MRS Mismatch Repair Systerm错配修复系统（组成作见课件）
SSB
MEC Mismatch correct enzyme 错配矫正酶（组成应见课件）
第七章DNA重组转座
复题（P212）
1 简述DNA重组概念意义
概念：DNA分子分子间发生遗传信息重新组合称遗传重组基重排
意义：迅速增加群体遗传样性利突变利突变分开：通优化组合积累意义遗传信息参许重生物学程DNA损伤复制障碍提供修复机制某基表达受DNA重组调节
2 DNA重组包括程？DNA重组关酶？
DNA重组Holliday模型四关键步骤：
①两源染色体DNA排列整齐
②DNA条链断裂DNA应链连接形成连接分子称Holliday中间体
③通分支移动产生异源双链（hetero duplex)DNA
④Holliday中间体切开修复形成两双链重组体DNA
酶：RecA 蛋白催化双链单链 DNA 反应阶段
RecBCD（外切核酸酶Ⅴ）具ATP解旋酶（旋）活性ATP增强切核酸酶活性赖ATP外切核酸酶活性
原核源重组蛋白
a RuvA 识 Holliday 结构连接点4聚体
b RuvB 分枝迁移提供动力（ATPase 10～20bps） 6聚体
c RuvC 核酸切酶专性识 Holliday 结构连接点
体外切断连接点拆分重组体识称四核苷酸5’ATTTGC
d DNA聚合酶DNA连接酶进行修复合成
3 什源重组？什Holiday模型？什特异位点重组？
源重组：称般性重组两条源区DNA分子通配链断裂连接产生片段间交换程
Holiday模型：源重组分子模型
Holiday中间体：源重组中连接两DNA双链交换中间物含4股DNA链连接处转换配形成交叉链连接点种结构称Holiday中间体
特异位点重组：整合酶催化两DNA序列特异位点间发生整合位点定源性赖DNA序列源性赖某酶特异结合DNA序列
4 细菌基转移机制？
接合作(conjugation）：细菌细胞相互接触时遗传信息细胞转移细胞称~
转化(transformation)：细菌品系吸收外援DNA（转化子）发生遗传性状改变现象
转导（transduction）：通噬菌体细菌基供体转移受体细胞程两种类型：普遍性转导局限性转导
细胞融合（cell fusion）：细胞质膜融合导致基转移重组
5 简述转座子概念转座子分类？什插入序列（IS）？
转座子：基组中移动段DNA序列直接基组位点移位点（供体受体）
转座：转座子基组位置转移位置程称转座
分类：转座子构成分插入序列（IS）复合型转座子（Tn）
插入序列（IS）：简单细菌染色体质粒某噬菌体正常组分
长度 750～1550bp
特点：a）转座酶基两端IR转座酶识位点（反重复序列）
b）插入靶位点会出现靶位点正重复（5～9bp）
c)较07515kb
6 复合型转座子（Tn）IS元件什异点？
特征：a）两端15～25bpInverted repeat IR反重复序列转座酶必需
b）具编码转座酶（transposase）基
c)转座两端正重复序列
点：Tn转座子中转座酶基外带药物抗性基(相关基)标志结构较复杂
7 简述复制型转座非复制型转座机制
复制型转座：转座子元件复制移动受体位点终转座程扩增转座子拷贝（供受点）特征：
1）转座原位置转座子保持变
2）新位置转座子两侧出现重复序列
3）转座程中合体(cointegrate
非复制型：称保留性转座转座元件直接部位转移部位原部位没保留利供体靶DNA序列直接连接需转座酶
非复制型转座程
（1）转座酶转座子供体DNA中释放出
转座酶受体DNA靶位点形成交错切口
（2）转座子插入交错切口(转座酶转酯反应)
（3）连接修复缺口单链受体DNA产生重复序列
8 转座子转座特征方面？
①基组位点转移位点复制子转移复制子
②独立形式存(噬菌体质粒DNA)基组部位直接转移部位
③转座子编码身转座酶次移动时携带转座必需基起基组跃迁转座子称跳跃基
④转座频率低插入机赖转座子(供体)靶位点(受体)间序列源性
⑤转座子插入结构基基调节序列引起基表达容改变例该基失活果重基导致细胞死亡
• 赖供体序列靶位点间序列源性赖recA
• 转座靶序列重复
• 转座插入靶位点非完全机（插入专型）
• 转座具排性(转座免疫性)Tn3排斥类转座子插入
• 转座具极性效应结构基功丧失表达水降
• 活化沉默基
• 区域性优先
9 DNA转座引起什遗传学效应
1引起基突变——插入切离
2插入位置染色体DNA重排产生新基
3转座产生染色体畸变（缺失倒位等）
4产生新变异利进化
10 什逆转录转座子？逆转录子基组功重影响？
逆转录转座：DNARNADNA转移程称反转座逆转录转座
逆转录子：类移动子转座程中需RNA中间体逆转录程分散基组中称~
影响：基表达影响（启动基表达编码关逆转录酶影响基表达等）
逆转录子介导基重排
生物进化中起重作
第十二章 原核生物基表达调控
1 什基表达调控？基表达调控什意义？
基表达调控：生物体基表达调节控制机制细胞中基表达程时间空间处序状态环境条件变化做出适反应复杂程
基表达调控意义：基表达调控生物体细胞分化形态发生体发育分子基础适应环境维持生长增殖维持体发育分化
2 基表达调控水进行？
基水 转录水转录水翻译水翻译水
3 原核基表达调控什特点？
原核生物基表达调控存转录翻译起始延伸终止步骤中操子单位进行
细胞控制种蛋白质时期表达水然通转录水翻译水调控发生转录水正负调控两种机制负调节调节子活性受变构效应调节
转录水基表达调控决定DNA结构RNA聚合酶功蛋白质子分子配基相互作原核生物调节原件种类少包括游启动区域调控原件激活蛋白阻遏蛋白结合位点
4 乳糖子例说明操子学说建立分子生物学研究重意义？
5 简述色氨酸操子阻遏系统弱化系统？
阻遏系统：色氨酸生物合成途径第调控转录否启动
色氨酸量时阻遏蛋白形成复合物结合操基阻止结构基转录终产物组织基转录
弱化系统：第二水控制决定着已启动转录否继续进行mRNA合成起始非培养基中完全没色氨酸否转录总前导区终止转录终止发生区域称弱化子衰减子前导区分四区域四区域片段两种方式进行碱基配核糖体前导区继续翻译功控制着两种结构转换决定mRNA否形成终止需结构产生弱化效应
6 名词解释：
式作原件 ：基表达调节活性DNA序列活性影响身处DNA分子基种DNA序列通常编码蛋白质位基旁侧含子中
反式作子：编码基识结合靶核苷酸序列DNA分子
结构基 ：编码蛋白质RNA基
操子：原核生物分子水基表达调控单位调节基启动子操基结构基等序列组成通调节基编码调节蛋白诱导物辅阻遏物协作开启关闭操基结构基表达进行正负控制
IPTG ： 异丙基硫代—β—D—半乳糖苷
(p)ppGpp：细菌应急应答反应引起ppGpp（鸟苷5位3’位分连二磷酸基团）pppGpp（鸟苷5位连3磷酸基团3’位连二磷酸基团）两种异常核苷酸量增加合称~(p)ppGpp产生关闭许基表达作影响许操子称超级调控子
CAP
cAMPCAP
第十三章 真核生物基表达
1真核生物基表达调控涉生命活动程？
真核基表达调控贯穿DNA功蛋白质全程染色体 染色质活性转录转录初始产物加工翻译等调控基调控重调节程
2简概括真核生物基表达调控7层次？
染色体染色质水结构变化基活化调节
转录水调控包括基开关转录效率高低
RNA加工水调控包括初始转录产物特异性剪接修饰火花编辑等
转录加工产物细胞核细胞质转运程中受调控
翻译水控制种mRNA结合核糖体进行翻译选择蛋白质合成量控制
蛋白质合成选择性激活控制蛋白质酶分子水剪切活性水控制
控制mRNA选择性降解调控
3真核生物基表达调控原核生物相什异点？
点：（新书P390）
原核细胞染色质裸露DNA真核生物细胞染色质DNA组蛋白紧密结合形成核体原核生物中染色质结构基表达没明显调控作真核生细胞中种作十分明显
原核基转录调控中激活物调控（正调控）阻遏物调控（负调控）二者种重（新书P410真核原核生物转录水调节控制第3点第5行原核生物通常负调控）真核细胞中然正调控成分负调控成分正调控真核基通常调控序列必须激活物时特异结合协作调节基转录
原核基转录翻译通常偶联真核生物时空分开调控更复杂
调控特异性表达机制（细胞特异性组织特异性）
相点：转录水调控转录水调控转录水调控重
结构基游游（甚部）存许特异调控成分异蛋白质子调控成分结合否调控基转录
起源相分子基础
4简述转录水真核生物原核生物调控区？
①原核生物功相关基常组织起构成操子作基表达调节单元真核生物基组成操子基身基启动子调节元件单独进行转录相关基间存着协调节拥式作元件反式作子基组成基群(gene battery)
②原核生物调节元件种类较少包括游启动区域调控元件激活蛋白(activator)阻遏蛋白(repressor)结合位点真核生物调节元件种类包括游调节元件组成型元件增强子沉默子反式作子激活子阻遏子等许短序列组成独立活化基表达基组中许中等重复序列作调节元件
③原核真核生物转录受反式调节子(转录激活子抑制子)调节类调节两水进行：通调节子生物合成(种类数量调节)程缓慢持续涉细胞分化等二通进行构象转变价修饰(活性调节)真核生物正调节．真核生物基表达调节子价修饰磷酸化磷酸化调节
④真核生物具染色质结构基活化首先需改变染色质状态转录子够接触作启动子称程染色质改型(chromatin remodeling)染色质水调节涉真核生物发育细胞分化等调节
5什增强子？特点？增强子转录正调控作？
增强子：指连锁基转录频率明显增加DNA序列发挥作方式通常方 距离关具组织特异性般转录激活子结合通作转录起始复合物增强RNA聚合酶活性 促进转录
增强子作特点：
增强转录作明显
位基组位置没基专性
具方性
远距离作
增强效应具组织细胞特异性特定蛋白质参发挥作
重复序列般长50bp
核心序列 (G)TGGATATAT(G)
许增强子受外部信号调控
增强子转录正调控作：
增强子UPE反式作调控子结合引起DNA构象变化甚DNA螺旋弯曲形成环状结构结合增强子种反式作子间相互作接触作启动子种蛋白质子促进转录起始物（PIC）组装激活转录
增强子序列原件特异蛋白质子结合位点模板DNA固定细胞核特定结构核基质利DNA拓扑异构酶发挥作
6简述Britten—Davidson模型该模型特点？
通特定激活子时控制含相受体基许结构基协表达含相受体基结构基组成组（set）
（1）重调节基：果传感基控制整合基时产生种激活子组基时激活进行协表达
（2）重受体基：果结构基邻具受体基受体基特异性激活子识结构基情况表达
特点：许基时调控调节单位（整合基受体基）重复性DNA序列
7反式作子DNA结合结构域？
DNA结合结构域转录激活结构域二聚化结构域
8常见蛋白质DNA结合区域特殊结构基序种类？
螺旋—转角—螺旋结构基序螺旋—突环—螺旋结构基序锌指结构基序亮氨酸拉链结构基序碱性结构基序β折叠
9名词解释
绝缘子：绝缘子(insulator)年发现类特殊式作元件增强子功阻止激活阻遏作染色质传递染色质活性限定结构域
HTH helixturnhelix螺旋—转角—螺旋结构基序：2a螺旋b转角隔开识螺旋DNA沟中特异结合段螺旋DNA非特异结合
HLH Helixloophelix 螺旋—突环—螺旋结构基序：40～50aa时具DNA结合形成蛋白质二聚体功含2亲脂性ahelix（15~16aa） 连接区（9~20aa）连接两性螺旋形成两面代表疏水氨基酸面代表带电氨基酸蛋白质通两螺旋相应表面疏水残基相互作形成源二聚体异源二聚体两亲性螺旋形成二聚体力HLH蛋白质具环作仅仅两螺旋区独立作
ZF zinc finger锌指结构基序含711锌9规律重复单位单位约30AA残基组成独立结构域23残基构成锌指突出部分锌离子形成维持结构关键锌指头部进入DNA分子沟中指结合5碱基45碱基5SrRNA基启动子长度接
第十四章
1 写出逆转录病毒逆转录病毒基组特点
2 逆转录酶三种酶活力？简述逆转录程？
三选择题
1RNA 合成底物
A dATP dTTP dGTP d CTP BATP TTP GTP CTP
C ATP GTP CTPUTP D GTP CTPUTPTTP
2．模板DNA碱基序列3′—TGCAGT—5′转录出RNA碱基序列：
A．5′—AGGUCA—3′ B．5′—ACGUCA—3′
C．5′—UCGUCU—3′ D．5′—ACGTCA—3′
E．5′—ACGUGT—3′
3转录终止必需
A终止子 Bρ子 CDNARNA弱相互作 D述三种
4转录终止程中时赖蛋白辅子实现终止作种蛋白辅子称
A σ 子 B ρ子 C θ子 D IF子
5．识RNA转转录终止子：
A．α子 B．β子 C．σ子 D．ρ子 E．γ子
6．DNA复制转录程许异点列DNA复制转录描述中错误：
A．体条DNA链模板转录两条DNA链模板复制
B．两程中合成方5′→3′
C．复制产物通常情况转录产物
D．两程均需RNA引物
E．DNA聚合酶RNA聚合酶需Mg2+
7核基mRNA 元拼接点序列
AAG……GU BGA……UG CGU……AG DUG……GA
8真核生物mRNA分子转录必须加工切分隔开编码序列连接起成蛋白质翻译模板程做RNA拼接
A 外显子 B 启动子 C 起始子 D 含子
9真核生物RNA polⅡ羧基端含段7氨基酸序列7肽序列TyrSerProThrSerProSer 称作
A C末端结构域 B 帽子结构
C Poly(A)尾巴 D 终止子
10．真核生物RNA拼接需种snRNP协助中识左端（5’）拼接点序列snRNP：
A．U1 snRNP B．U2 snRNP C．U5 snRNP E．U2 snRNP+ U5 snRNP
五问答题
1 简述转录基程
答：⑴全酶启动子结合封闭型启动子复合物形成（ R位点σ子发现结合 ）
⑵开放型启动子复合物形成：
①RNApol适合位点达－10序列区域诱导富含A·TPribnow 框熔解 形成12－17bp泡状物时酶分子－10序列转移牢固结合
②开放型启动子复合物RNApol聚合酶定
③两种复合物均二元复合物（全酶DNA ）
⑶开放型启动子复合物中RNApolI位点E位点核苷酸前体间形成第磷酸二酯键 （β亚基）三元复合物形成 +1位CAT模式位离开保守T 6~9 核苷酸处
⑷σ子解离 →核心酶DNA亲力降起始程结束→核心酶移动进入延伸程
2 试较原核真核细胞mRNA异
⑴原核生物
①原核生物mRNA 半衰期短
②许原核生物mRNA反子形式存
③5’端帽子结构3’端没较短poly(A)
④原核细胞mRNA（包括病毒）时编码肽
⑤原核生物常AUG（时GUG甚UUG）作起始密码子
⑵真核生物：
①5’端存帽子结构
②绝数真核生物mRNA具poly(A)尾巴
③RNA编码肽
④真核生物永远AUG起始密码子
3 Ecoli例说出Prok启动子结构部分功
答：启动子两部分组成：
游部分 — CAPcAMP结合位点（基表达调控正控制位点）
CAP：降解物基活化蛋白环腺苷酸（cAMP）受体蛋白
游部分 — RNApol进入（结合）位点 －35 ~ －10包括识位点结合位点
1） Sextama 框：35序列位复制起点游35核苷酸处6核苷酸序列RNA聚合酶全酶识结合中σ亚基识中起关键作
2） Pribonow 框：10序列位10处6核苷酸序列（TATAAT）RNA聚合酶识DNA双链中反义链确保转录链方误
4． 真核生物RNA聚合酶区分类 分转录RNA
根 α 鹅膏蕈碱敏感性分三类：
RNApolⅠ：敏感（动植昆） RNApol Ⅱ：敏感 RNApol Ⅲ：种类敏感性
转录产物：
RNApolⅠ：核仁 活性占例 转录rRNA（58S18S 28S）
RNApolⅡ：核质 负责 hnRNAsnRNA 转录
hnRNA（mRNA 前体核均RNA） snRNA（核分子 RNA ）
RNApol Ⅲ：核质 负责 tRNA5S rRNAAlu序列部分 snRNA
5． 真核生物25 ~ 35区70 ~ 80区保守序列分什？
Sextama框 (Sextama Box)35序列 数启动子中序列TTGACA
CAAT框（CAAT box）：致序GGGTCAATCT真核生物基常调节区位转录起始点游约80100bp处RNA聚合酶结合处控制着转录起始频率
6． 真核生物种启动子
真核生物中三种RNA聚合酶三种启动子：RNA polⅠ启动子RNA polⅡ启动子RNA polⅢ启动子
7． 说明poly(A)分子生物学实验中应价值
a) oligo (dT) 载体相连总体RNA中分离纯化mRNA
b) 寡聚dT（oligo (dT)）引物反转录合成 cDNA
8． EukmRNA帽子种类
帽子0 （Cap0） m7GpppXpYp（）m7G N7—甲基鸟苷
帽子1 （Cap1） m7GpppXmpYp第核苷酸 2’O 位产生甲基化 （A N6 位甲基化）
帽子2（Cap2） m7GpppXmpYmp第二核苷酸 2’O 位产生甲基化（AGCU）
9． 真核生物mRNA3poly(A)编码情况准确生成机制？
数真核生物mRNA 3＇末端100~200A组成Poly（A）尾巴
生成：a RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A) 聚合酶）催化前体－－ATP
反应： Mg++ Mn++
聚核糖核酸+nATP ————>聚核糖核酸(A)n + nPPi
b添加位点
切酶(360KDa)切段序列———> poly(A) 聚合酶催化添加poly(A)
切酶识位点（子参）
切点游 13－20bp处AAUAAA 切点游 GUGUGUG （单细胞Euk外）
10． 增强子早里发现简述5作特点
SV40两正重复研究清楚（DR）107~ 178 179 ~ 250 72bp
该增强子特点：
⑴赖TATA框转录增强效应高赖情况
⑵距离效应 离72bp越容易起始转录
⑶转录方离开72bp起始序列优先转录
⑷细胞类型选择：类型中作差异
11． 剪接体成分组成？试述剪接程中组分组装程剪接机制
剪接体：五核核糖核酸百蛋白质组成型核糖核酸蛋白质复合物称核核糖蛋白
剪接体剪接剪接涉两步骤生物化学程两步骤均需RNA间进行转酯反应tRNA剪接没交醋化转酯化程
剪接体剪接交酯化反应发生特定次序首先含子特定剪接分支位点核苷酸会含子第核苷酸产生转酯化反应形成两RNA分子含子套索含子前外显子第二第外显子核苷酸会第二外显子首核苷酸产生转酯化反应连接外显子释放含子套索
12． 真核生物mRNA前体含子剪接信号序列特征什？
mRNA前体中含子两端边界存序列序列产生mRNA前体剪接信号数细胞核mRNA前体中含子5’边界序列GU3边界AG
13． 13剪接分支位点核苷酸什？
腺嘌呤核糖核苷酸
14．什选择性剪接？说明选择性剪接果蝇性决定中作机制
选择性剪接指透基转录相premRNA剪接选择产生mRNA异构物产生种相似独特蛋白质产生出稳定性低mRNA产物达调节基表现目
15 I型含子发生改变产生酶活性果活性意味着I型含子催化中心什特点？
答：活性包括：RNA聚合酶切核酸酶磷酸酶连接酶活性I 型含子转变成酶力表明结合RNA糖—磷酸骨架催化前反应例连接剪切相反反应
16 转录涉模板链编码链分离解释转录中单链DNA样保护
答： 转录程中控板编码链分离时聚合酶覆盖整转录泡——解旋位点螺旋重新形成位点单链DNA保护起复制转录需单链结合蛋白参
17 三序列原核生物mRNA精确转录必少
答： 35(RNA聚合酶结合位点)10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列终止子
18． 原核生物真核生物启动子差？
原核生物
TTGACA TATAAT起始位点
35 10
真核生物
增强子GC CAATTATAA—5mGpp—起始位点
110 70 25
19．双链DNA分子图示体编码五氨基酸残基肽：
3’TAC ATG ATC ATT TCA CGG AAT TTC TAG CAT GTA5’
5’ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT3’
试问：（1）．条链转录模板链？
5’ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT3’
（2）．写出该五氨基酸残基肽
AUG CUA GAA AUU CCG (UGA)
分析：
5UAC AUG AUC AUU UCA CGG AAU UUC UAG CAU GUA3
3AUG UAC UAG UAA AGU GCC UUA AAG AUC GUA CAU5
7． 试证明基中条DNA链作模板转录
答：基两条链均转录RNA聚合酶5’ →3’方合成两条DNA链会相反方转录两信携带着彼互补反核苷酸序列编码肽然某DNA序双方转录常见现象早明确证通研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillus subtilis) SP8DNA特：条链(重链)富含嘌呤链(轻链)富含嘧啶双链DNA温加热两条链分离(DNA变性)密度梯度离心分离两条链 1963年Julius MarmurPaul DotySP8感染枯草杆菌细胞提取RNA发现噬菌体DNA重链杂交(互补配形成DNARNA杂合分子)会轻链杂交显易见信条DNA链(重链)互补DNA双链中条链作转录模板(图A78) MarmurDoty幸运选SP8做实验全部基条DNA链中转录噬菌体包括T4λ噬菌体部分基条链转录基条链转录噬菌体SP8做实验成功说明问题
8． 认mRNA核苷酸序列长300碱基样： (1)证明RNAmRNAtRNArRNA (2)确定真核原核mRNA
答：根序列组成进行判断： (1)序列太长tRNA果rRNA应该含许特殊元件：假 尿嘧啶5—甲基胞嘧啶 时应具形成发夹环反重复序列果 mRNA应AUG起始密码子段相应氨基酸密码子相应终止密码子构成读框 (2)真核生物mRNA5’端含7—甲基鸟苷数3’端 长po1yA尾巴原核生物mRNA具原核生物mRNA5’端l—核糖体结合序列(SD序列)
22 详述样加工真核生物mRNA 成熟
首尾修饰
15’端加帽 成熟真核生物mRNA结构5’端形成m7GpppmXpYp帽子结构
23’端加尾 数真核生物mRNA3’端聚（A)尾长约100－200核甘酸
二真核生物mRNA剪接
剪接细胞核中 hnRNA中含子连接酶作外显子部分连接起程程特点：
(1)mRNA前体剪切部位含子末端特定部位已发现数含子GU5＇端起始末端AGOH3’5＇GUAGOH3＇称剪接接口(splicing junction)边界序列剪接GUAG定剪掉
(2)套索结构形成剪接 剪接程分两步反应进行A A Klessing模式含子弯曲成套索状形成 套索RNA（larial RNA）B含子套索形式剪切外含子相连接
(3)剪接体形成 剪接体（spliceosome）种非特异核核糖核蛋白（UsnRNP）mRNA前体结合成UsnRNP族snRNA参剪接作种UsnRNP
23． 谓RNA编辑？RNA编辑生物学意义
RNA编辑：指基转录产生mRNA分子中核苷酸缺失插入置换基转录物序列基编码序列互补翻译生成蛋白质氨基酸组成基序列中编码信息现象
RNA编辑具重生物学意义： 校正作调控翻译扩充遗传信息
1）形成删AUG UAA UAG UGA…
2）改变codon信息
3）扩编码遗传信息量较程度改变DNA遗传信息该基DNA序列仅串简略意义模糊序列称隐秘基模糊基
4）中心法发展
第五章
名词解释
1．翻译 mRNA模板氨酰tRNA原料直接供体种蛋白质子酶参核糖体mRNA分子核苷酸序表达特定氨基酸序蛋白质程
2．密码子 mRNA中碱基序蛋白质中氨基酸序应关系通密码实现 mRNA中三相邻碱基决定氨基酸三相邻碱基称密码子
3．密码简性 —氨基酸具两密码子现象
4．义密码子 —种氨基酸编码密码子称义密码
5．变偶假说 指反密码子前两碱基(3’端)标准密码子前两碱基(5’端)配反密码子中第三碱墓某种程度变动种碱基配
6．移码突变 mRNA中插入删核苷酸会读码发错误称移码移码造成突变称移码突变
7．功受体 转运种氨基酸种tRNA称功受体
8．Anticodon 指tRNA反密码子环中三核苷酸序列蛋白质合成程中通碱基配识结合mRNA特殊密码
9．核糖体 mRNA时干核糖体结合形成念珠状结构称核糖体
10．Paracodon tRNA 分子决定携带氨基酸分子区域称副密码子
11．Signal peptide 某种分泌蛋白质细胞膜蛋白质等前体物质肽形式合成N末端含作通膜时信号氨基酸序列种氨基酸序列称信号肽信号序列（signal sequence）
二填空题
1．蛋白质生物合成mRNA模板氨酰tRNA原料直接供体核糖体合成杨
2．生物界64密码子中61氨基酸编码起始密码子AUG终止密码子UAA UAG UGA
3．原核生物起始tRNAtRNAf表示真核生物起始tRNAtRNAi表示延伸中甲硫氨酰tRNAtRNAm表示
4．植物细胞中蛋白质生物合成核糖体线粒体叶绿体三种细胞器进行
5．延长子TTuTs两亚基组成Tu热稳定蛋白质Ts热稳定蛋白质
6．原核生物中释放子三种中RF1识终止密码子UAAUAGRF2识UAAUGA真核中释放子RF种
7．氨酰tRNA合成酶氨基酸相应tRNA高度选择性
8．原核细胞起始氨基酸甲酰甲硫氨酸起始氨酰tRNA甲酰甲硫氨酰tRNA
9．原核细胞核糖体亚基16SrRNA协助辨认起始密码子
l0．形成肽键消耗4高磷酸键合成起始时需消耗1高磷酸键
11．肽基转移酶蛋白质生物合成中作催化肽键形成肽酰tRNA水解
12．肽链合成终止时终止子进A位识出终止密码子时终止子肽基转移酶催化作转变水解作
13．原核生物核糖体30S亚基50S亚基组成真核生物核糖体40S亚基60S亚基组成
14 蛋白质中进行磷酸化修饰氨基酸残基SerThrTyr
15 氨基酸具密码子编码氨基酸密码子称义密码
16 蛋白质跨膜需信号肽引导蛋白伴侣作辅助肽链折叠成天然构象蛋白质
17 信号识颗粒（SRP）分信号识结构域延伸作制动结构域两结构域作翻译程中够识信号序列指导核糖体转运通道
18高等哺乳动物肠杆菌基中相终止密码子UAGUGA类线粒体基终止密码子UAAUAGAGAAGG
19开放阅读框指新测DNA序列中计算机辨认出编码区域起始密码子起终止密码子止段连续密码子区域
20 tRNA反密码子UGC识密码子ACG
21 新生肽链增加氨基酸单位需进位转肽移位三步反应中进位移位反应中需分子GTP提供量
三选择题
1．蛋白质生物合成方( D )
AC→N端 B定点双进行 CN端C端时进行 DN→C端
2．合成蛋白质细胞器( C )
A线粒体 B叶绿体 C高尔基体 D核糖体
3．真核生物延伸子( D )
AEF—Tu BEF2 CEFG DEF1
4．真核生物释放子( A )
ARF BRF1 CRF2 DRF3
5．tRNA反密码子中I碱基配( D )
AAG BCU CU DUCA
6．蛋白质合成需量( C )
AATP BGTP CATPGTP DGTP
7．tRNA作( B )
A氨基酸连接氨基酸 B氨基酸带mRNA位置
CmRNA接核糖体 D增加氨基酸效浓度
8．关核糖体移位叙述正确( C )
A空载tRNA脱落发生A位 B核糖体mRNA3’→5’方相移动
C核糖体mRNA5’→3’方相移动
D核糖体mRNA次移动距离相二核苷酸长度
9．蛋白质合成中列步需消耗高磷酸键( A )
A肽基转移酶形成肽键 B氨酰tRNA核糖体A’位点结合
C核糖体mRNA移动
DfMet—tRNAfmRNA起始密码子结合亚基结合
10．真核细胞中肽链合成终止原( D )
A已达mRNA分子头 B具特异tRNA识终止密码子
C终止密码子身具酯酶作水解肽酰tRNA酯键
D终止密码子终止子(RF)识
11．蛋白质生物合成中终止密码( A D E )
AUAA BUAU CUAC DUAG EUGA
12．根摆动假说tRNA反密码子第1位碱基I时够识种密码子( A B E )
AA BC CG DT EU
13．列子真核生物蛋白质合成起始子( C D E )
AIF1 BIF2 CeIF2 DeIF4 EelF4A
14．蛋白质生物合成具列特征( A B C E )
A氨基酸必须活化 B需消耗量 C延长氨基酸必须进位转肽移位税落四步骤 D合成肽链C端N端断延长 E新生肽链需加工成活性蛋白质
15．列容属蛋白质合成加工修饰( B C D E )
A切含子连接外显子 B切信号肽 C切N端Met
D形成二硫键 E氨侧链修饰
16．蛋白质生物合成程中列步骤需消耗量( A B C E )
A氨基酸分子活化 B70S起始复合物形成 C氨酰tRNA进入核糖体A位 D肽键形成 E核糖体移位
17．原核生物肽链延伸程列物质参( A B C E )
A肽基转移酶 B鸟苷三磷酸 CmRNA D甲酰甲硫氨酰tRNA EEFTuEFTs EFG
18ShineDalgarno序(SD序)指： ( A )
AmRNA分子起始码游813核苷酸处序
BDNA分子转录起始点前813核苷酸处序
C16srRNA3＇端富含嘧啶互补序 D启动基序特征 E正确
19 研究蛋白合成中利嘌呤霉素： ( B )
A亚基解聚 B肽链提前释放 C抑制氨基酰tRNA合成酶活性 D防止核糖体形成 E正确
20 氨基酸活化酶：( D )
A活化氨基酸氨基 B利GTP作活化氨基酸量源
C催化tRNA5’磷酸相应氨基酸间形成酯键
D种酶特异作种氨基酸相应tRNA E正确
21核糖体制造D工厂
A 核酸 B 糖类 C 纤维素 D 蛋白质
22mRNAB连续核苷酸决定特定氨基酸
A 2 B 3 C 4 D 5
23部分原核生物起始密码子D
A GUA B UAG C AGU D AUG
24核糖体包含两种成分A
A 蛋白质rRNA B DNARNA
C 糖rRNA D DNA蛋白质
25携带氨基酸相B组tRNA称功tRNA
A 密码子 B 反密码子 C 终止子 D 含子
26真核生物中核糖体亚基60S 亚基40S 整核糖体A
A 80S B 100S C 70S D 50S
27．终止密码子UAAUAGUGA说： C
A．氨酰tRNA仅识UAA B．氨酰tRNA仅识UAG
C．氨酰tRNA识终止密码子 D．氨酰tRNA均识
E．氨酰tRNA仅识UGA
28原核生物mRNA起始密码子AUG游813核苷酸段受核糖体结合保护富含嘌呤39核苷酸序列般5’AGGAGGU3’ 称A序列
A SD B Hogness D sextama D pribnow
29细菌蛋白质合成起始子D
A EFGEFTsEFTu B eIF1eIF2eIF3
C eEFGeEFTseEFTu D IF1 IF2 IF3
30氨酰基tRNA进入核糖体A位点肽链形成关键B
AGTP存 BGTP水解 CATP存 DATP水解
五问答题
1．参蛋白质生物合成体系组分具什功
①mRNA：蛋白质合成模板
②tRNA：蛋白质合成氨基酸运载工具
③核糖体：蛋白质合成场
④辅助子：
(a)起始子—参蛋白质合成起始复合物形成
(b)延长子—肽链延伸作
(c)释放子终止肽链合成核糖体释放出
2．遗传密码破译
(1) 体外细胞蛋白质合成体系中加入工合成polyＵ 开创破译遗传密码先河
(2) 混合聚物(mixed copolymers)实验密码子中碱基组成测定
(3) aatRNA确定三核苷酸序列(密码子)结合
3．遗传密码什特点
(1)密码标点：起始密码始终止密码止需连续阅读中断增加删某核苷酸会发生移码突变 (2)密码重叠：组成密码三核苷酸代表氨基酸次重叠
(3)密码简性：密码子表中MetTrp应密码外余氨基酸均两密码保持生物遗传稳定性具重意义
(4)变偶假说：密码专性头两位碱基决定第三位碱基重性反密码子相互作中具定灵活性
(5)通性例外：球切生物套遗传密码年已发现某例外现象某哺乳动物线粒体中UGA终止密码色氨酸密码子
(6)起始密码子AUG时代表Met终止密码子UAAUAGUGA频率
4．简述三种RNA蛋白质生物合成中作
(1)mRNA：DNA遗传信息通转录作传递mRNAmRNA作蛋白质合成模板传递遗传信息指导蛋白质合成
(2)tRNA：蛋白质合成中氨基酸运载工具tRNA反密码子mRNA密码子相互作分子中遗传信息转换成蛋白质氨基酸序遗传信息转换器
(3)rRNA 核糖体组分形成核糖体结构功起重作核糖体中蛋白质辅助子起提供翻译程需全部酶活性
5．氨基酸蛋白质合成程中样活化
催化氨基酸活化酶称氨酰tRNA合成酶形成氨酰tRNA反应分两步进行：
(1)活化 需Mg2+Mn2+ATP供合成酶催化生成氨基酸AMP酶复合物
(2)转移 合成酶催化氨基酸氨基酸—AMP—酶复合物转移相应tRNA形成氨酰tRNA
6．简述蛋白质生物合成程
(1)氨基酸活化：游离氨基酸必须活化获量参蛋白质合成氨酰tRNA合成酶催化消耗1分子ATP形成氨酰tRNA
(2)肽链合成起始：起始子参mRNA30S亚基50S亚基起始甲酰甲硫氨酰tRNA(fMettRNAt)形成70S起始复合物整程需GTP水解提供量
(3)肽链延长：起始复合物形成肽链开始延长首先氨酰tRNA结合核糖体A位然肽酰转移酶催化P位起始氨基酸肽酰基形成肽键tRNAf空载tRNA留P位．核糖体mRNA5’→3’方移动密码子距离A位延长氨基酸单位肽酰tRNA转移P位全部程需延伸子EFTuEFTs量GTP提供
(4)肽链合成终止核糖体移终止密码UAAUAGUGA时终止子RF1RF2识终止密码肽酰转移酶活性转水解作P位肽酰tRNA水解释放肽链合成终止
7．蛋白质合成中保证翻译正确性
(1)氨基酸tRNA专结合保证tRNA携带正确氨基酸
(2)携带氨基酸tRNAmRNA识mRNA密码子tRNA反密码子相互识保证遗传信息准确误转译
(3)起始子延长子作起始子保证起始氨酰tRNA进入核糖体P位起始密码子结合延伸子高度专性保证起始tRNA携带fMet进入肽链部
(4)核糖体三位点模型E位A位相互影响防止正确氨酰tRNA进入A位提高翻译正确性
(5)校正作：氨酰tRNA合成酶tRNA校正作占核糖体A位氨酰tRNA校变异校基校基间校等种校正作保证翻译正确
8．原核细胞真核细胞合成蛋白质起始程什区
(1)起始子：原核IF1IF2IF2真核起始子达十种
(2)起始氨酰tRNA：原核fMettRNAf真核MettRNAi
(3)核糖体：原核70S核粒体分30S50S两种亚基真核80S核糖体分40S60S两种亚基
9．蛋白质合成加工修饰容
(1)水解修饰
(2)肽键中氨基酸残基侧链修饰
(3)二硫键形成
(4)辅基连接亚基聚合
10．真核细胞原核细胞核糖体组成什证明核糖体蛋白质合成场
原核细胞：70S核糖体30S50S两亚基组成
真核细胞：80S核糖体40S60S两亚基组成
利放射性位素标记法通核糖体分离证明
11 已知种突变噬菌体蛋白单核苷酸插入引起移码突变正常蛋白质突变体蛋白质胰蛋白酶消化进行指纹图分析结果发现肽段差异测基酸序： 正常肽段 MetValCysValArg
突变体肽段 MetAlaMetArg
（1）什核苷酸插入什方导致氨基酸序改变？
（2）推导出编码正常肽段突变体肽段核苷酸序列
提示：关氨基酸简密码分
Val： GUU GUC GUA GUG Arg： CGU CGC CGA CG AGA AGG
Cys： UGU UGC Ala： GCU GCC GCA CGC
(1)正常肽段第Val密码GUAG插入C (2) 正常肽段核苷酸序列：AUG GUA UGC GU… CG…突变体肽段核苷酸序列：AUG GCU AUG CGU
12 试较原核生物真核生物翻译
原核生物真核生物翻译较：仅述真核生物原核生物相反
（1）起始Met需甲酰化
（2）SD序列需扫描程
（3）tRNA先mRNA核糖体亚基结合
（4）起始子较
（5）终止释放子
第六章
名词解释
1式作组件 具调节功特定DNA序列影响分子中相关基表达位受调控DNA编码区段游基表达调控关式作元件启动子增强子沉默子
2反式作子 指直接间接识结合类式作元件核心序列参调控靶基转录效率蛋白质发生突变时影响染色体等位基表达
3结构基 决定合成某种蛋白质分子结构相应段DNA结构基功携带遗传信息转录mRNA（信核糖核酸）mRNA模板合成具特定氨基酸序列蛋白质
4调节基 调节蛋白质合成基结构基需某种酶时合成某种酶需时停止合成染色体结构基调节作
5操基 位结构基端操结构基基操作基开动时处染色体控制结构基开始转录翻译合成蛋白质关闭时结构基停止转录翻译操作基系列受操结构基合起形成操子
6阻遏蛋白 阻遏蛋白基某种调节基制成种控制蛋白质原核生物中具抑制特定基（群）产生特征蛋白质作
7操子 指包含结构基操基启动基相邻基组成DNA片段中结构基表达受操基调控
8辅阻遏物 阻遏系统中产生阻遏作分子物质做辅阻遏物
9组成型表达 指生物生命全程中体细胞类型中均持续表达少受环境素影响基通常称家基
10诱导型表达 指某基表达极易受环境变化影响特定环境信号刺激基表达开放增强基表达关闭降
11IPTG效应物 异丙基βD硫代半乳糖苷β–半乳糖苷酶活性诱导物质常蓝白斑筛选
12CAP 环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ）cAMPCRP结合形成复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）
13cAMPCAP 操子cAMPCAP调节cAMPCAP复合物阻遏物正调控子
14反子 mRNA分子编码肽链肽链应DNA片断位转录单位享起点终点
15单反子 真核基转录产物单反子种基编码种肽链RNA链基转录调节元件
16Attenuator弱化子 trp操子mRNA合成起始非培养基中完全没色氨酸转录总仅产生—140核苷酸RNA分子终止区域称衰减子弱化子
17游启动子元件 TATA框游保守序列称游启动子元件游激活序列
二填空题
1．启动子中元件通常分两种：核心启动子元件游启动子元件
2 表达正调控系统中加入调节蛋白基表达活性开启种调节蛋白称辅基诱导蛋白负调控系统中加入调节蛋白基表达活性关闭种调节蛋白称阻遏蛋白
3 糖细菌双重作方面作碳源供细胞生长方面细胞壁成分需赖cAMP—CRP启动子S2进行底水永久型合成时需赖cAMP—CRP启动子S1高水合成进行调节G时转录S2开始G时转录S1开始
三选择题
1果没D存时基表达加入种D基活性关闭种控制系统做负调控系统
A 结构基 B 启动子 C 操基 D 调节蛋白质
2cAMP受体蛋白D
A ATP B ADP C UTP D CAP
3终产物RNA基进行AA处理完成基表达全程
A 转录…………转录 B 转录…………翻译
C 复制…………转录 D 复制…………翻译
四非题
1操子细菌基调控表达完整单元 （ × ）
2 细菌中衰减子作方式翻译手段控制转录 （ √ ）
五简答题
1乳糖操子作机制？
⑴乳糖操子组成：肠杆菌乳糖操子含ZYA三结构基分编码半乳糖苷酶透酶半乳糖苷乙酰转移酶外操序列O启动子P调节基I
⑵阻遏蛋白负性调节：没乳糖存时I基编码阻遏蛋白结合操序列O处乳糖操子处阻遏状态合成分解乳糖三种酶乳糖存时乳糖作诱导物诱导阻遏蛋白变构结合操序列乳糖操子诱导开放合成分解乳糖三种酶乳糖操子种调控机制诱导负调控
⑶CAP正性调节：启动子游CAP结合位点肠杆菌葡萄糖碳源环境转变乳糖碳源环境时cAMP浓度升高CAP结合CAP发生变构CAP结合乳糖操子启动序列附CAP结合位点激活RNA聚合酶活性促进结构基转录调节蛋白结合操子促进结构基转录乳糖操子实行正调控加速合成分解乳糖三种酶
⑷协调调节：乳糖操子中I基编码阻遏蛋白负调控CAP正调控两种机制互相协调互相制约
2正调控负调控什？
负调控时调节基蛋白质产物基活性种阻遏物正调控时调节基产物种激活物
3区(1)启动子增效突变启动子减效突变(2)游序列游序列
(1)启动子部突变会增强降低转录水
(2)启动子关游序列转录．方致游序列转录方相反
4三序列原核生物mRNA精确转录必少
⑴启动子（Promotor）启动子序列10bp35bp处 两6核苷酸组成序列（consensus sequence）区段碱基命名10区35区许启动子10区核苷酸序列相似TATAAT称TATA boxPribnow框RNA Pol牢固结合位点简称结合位点35区部分启动子TTGACA序列RNA Polσ亚基识位点称Sextama框
⑵编码序列指导mRNA合成
⑶终止子功RNA合成停止终止点位置RNA Pol停止RNA释放mRNA
5葡萄糖影响涉糖代谢操子(葡萄糖敏感型操子)表达
缺乏葡萄糖时cAMP水升高CAP蛋白葡萄糖敏感操子中启动子 CAP 位 点结合转录作协起始果葡萄糖cAMP．水降CAP蛋白结合转录速率协降
6 简述乳糖操子正负调控机制
⑴阻遏蛋白负调控
①细胞诱导物时诱导物结合阻遏蛋白刻聚合酶启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操子结构基
②诱导物时阻遏蛋白结合启动子蛋白质部分重叠转录
⑵CAP正调控
①细胞缺少葡萄糖时ATP→CAMP结合CRP生成CAPCAP位点结合增前RNA聚合酶转录活性
②葡萄糖存时CAMP分解合成少CAP启动子CAP位点结合RNA聚合酶操区结合法起始转录结构基表达降
7 激活蛋白（CAP）转录正调控作？
环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein）cAMPCRP结合形成复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）肠杆菌生长缺乏葡萄糖培养基中时CAP合成量增加CAP具激活乳糖（Lac）等启动子功赖CRP启动子缺乏般启动子具典型35区序列特征（TTGACA）RNA聚合酶难结合
CAP存（功）：显著提高酶启动子结合常数表现二方面：
①CAP通改变启动子构象酶相互作帮助酶分子正确定便10区结合起取代35区功作
②CAP抑制RNA聚合酶DNA中位点结合提高特定启动子结合概率
8 简述衰减子作机理
肠杆菌中衰减作赖转录翻译紧密偶联RNA聚合酶刚转录出前导肽部分密码子核糖体开始翻译细胞中色氨酸时核糖体够利翻译出整前导肽终止密码子ＵＧＡ（＋７０）处停时核糖体占序列１部分序列２序列２序列３配序列３４配产生终止子发夹结构实现转录终止出现色氨酸饥饿时核糖体停顿两trp密码子时核糖体占序列１留完整序列２便转录出转录出序列３形成二级结构样序列４转录出单链状态终止子形成转录继续
9lacZlacY突变体生长含乳糖培养基时lac操子中剩余基没诱导解释原
异乳糖乳糖操子天然诱导物乳糖末诱导细胞中少量 β半乳糖苷酶代谢产生 lac突变中完全存 β半乳糖苷酶乳糖代谢 lacZ中完全没透性酶乳糖进入细胞样两种突变体中产生异乳糖操子中余基培养基中乳糖诱导表达基 IPTG样安慰诱导物诱导 IPTG作诱导物需透性酶帮助进入细胞
10衰减作调控Ecoli中色氨酸操子表达
衰减作根 tRNATrp数量调节 Trp操子表达 tRNATrp数量取决细胞中 Trp水Trp操子 mRNA前导序列长包括编码长 14氨基酸肽需全部遗传信息(包括 AUG起始密码 UGA 终止密码)肽含两相邻 Trp残基色氨酰tRNA前导肽翻译必少衰减作发生必条件：(1)翻译产生前导肽(2)转录翻译偶联样 RNA聚合酶转录前导序列时核糖体紧接着结合新生 mRNA翻译产生前导肽mRNA 前导序列包括两相似反重复序列序列 2序列 1 3部分互补 样 1+2 2+3 3+4 1+2 3+4 通碱基配形成茎环结构 序列 3 4 配形成茎环结构 Trp操子终止子基相终止子样 茎 3’侧具 7 连续 U 形成尾巴形成种衰减子结构时终止子样转录终止注意两 Trp密码位序列 1 前导肽终止密码序列 l 2间样果色氨酸量充足tRNATrp含量够前导肽翻译进行终止密码 UGA 结合核糖体覆盖 l 2两区域样 1 22 3 两序列形成茎环结构 34两序列形成衰减子环起终止子作导致 RNA聚合酶分子脱离 DNA模板方面果色氨酸缺乏存色氨酰tRNA少导致核糖体停止两 Trp密码前样核糖体仅盖住区域 l序列 4 转录前序列 2 序列 3 形成茎环结构结构形成阻止序列 3 序列 4形成终止子结构出现通读切操子部分继续转录事实 mRNA 核糖体位置决定mRNA 二级结构衰减作否发生
12举例说明原核生物基表达调控机理
Ecoli 乳糖操子中结构基lacZlacylacA三基离编码βD半乳糖苷酶βD半乳糖苷透性酶βD半乳糖苷转乙酰酶调节基lacI编码阻遏蛋白启动子lacP操基lacO负调控：细胞引诱物时阻遏蛋白够操基联合操基启动子定程度重叠妨碍RNA聚合酶10序列形成开放性启动子复合物细胞引诱物存时引诱物极高浓度阻遏蛋白快速联合改变阻遏蛋白构象快速操基解离样RNA聚合酶启动子牢固联合形成开放性启动子复合物开始转录lacZYA结构基正调控：cAMPCAP复合物乳糖操子正调控子乳糖启动子两CAP联合位点7050（位点I）50D40（位点II）位点I包含逆反复序列彷佛数强联合位点特征位点II弱联合位点cAMPCAP复合物联合位点I时位点II联合cAMPCAP复合物力显著提高旦位点II占领RNA聚合酶快35序列联合然10序列联合
13预测具列突变λ噬菌体感染细菌表型说明原：（1）产生抗蛋白酶λCII蛋白突变（2）具阻止蛋白结合结合λOR2突变（3）λ基失作突变（4）编码λCI蛋白基突变
(1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)λ噬菌体感染程中N蛋白(PL左侧表达)基表达N基游终止前生理功正常抗终止导致ccro基游表达cⅡ蛋白合成λcⅡ蛋白突变体具蛋白酶抗性活性辞感染细胞状态(健康病态)cⅡ蛋白维持cⅡ蛋白整合导致高浓度cⅡ蛋白助PREP1启动子转录cI蛋白(阻抑蛋白)cro反义RNA整合酶(λ噬菌体整合需)合成阻抑蛋白占0ROL操基通调节促进身合成(PRM表达)防止更N蛋白Cro蛋白合成
(2)够阻止蛋白质结合0R2突变体会导致裂解0R2搬突变体够防止Cro蛋白阻抑蛋白结合cro基表达需诱导物高水表达 Cro蛋白OR3进行非协结合种结合阻抑基表达需身产物诱导形成阻抑蛋白Cro终会关闭早期基表达通诱导PQ开始表达诱发中期期基表达综述Cro会摆脱阻抑蛋白影响
(3)失活λN基突变令导致灭活降解N基产物抗终止子N cro基外基表达需结果量缺陷N蛋白Cro蛋白合成噬菌体进入溶源状态进入裂解途径DNA终降解
(4)编码cI蛋白基发生突变时会导致快速裂解产生没功阻抑蛋白0ROL操基结合没竞争Cro会摆脱阻抑蛋白影响
第七章
名词解释
1增强子 指增加连锁基转录频率DNA序列增强子通启动子增加转录效增强子位基5’端位基3’端位基含子中
2基扩增 细胞选择性复制DNA 产生量拷贝
3基重排 通基转座DNA断裂错接正常基序发生改变
4基序 DNA蛋白质等生物分子中保守序列
5沉默子 基表达负调控种元件结合特异蛋白子时基转录起阻遏作
6绝缘子 长约百核苷酸通常位启动子正调控元件(增强子)负调控子(异染色质)间种调控序列绝缘子身基表达没正效应没负效应作调控元件基活化效应失活效应发生作
7DNA结合结构域 肽链蛋白分子中结合DNA结构区域通DNA结合发挥作（eg调控基表达）
8源异型盒 简称源框源异型基中段高度保守DNA序列源框180碱基组成序列编码60氨基酸源框普遍存果蝇鼠蛙等生物中
9断裂基 基编码序干非编码区域（间隔序列）隔开阅读框连续种基称隔裂基
10应答元件 位基游转录子识结合调控基专性表达DNA序列
11螺旋环螺旋基序 2α螺旋间隔非螺旋环(loop)组成．原癌基产物Cmyc结合蛋白Max．
12螺旋转角螺旋基序 两段螺旋短转角结构分开中段螺旋DNA识螺旋
13bZIP蛋白 蛋白亮氨酸拉链附存碱性结构域蛋白
14锌指结构 肽链保守序列中组氨酸加半胱氨酸(His2／Cys2)2半胱氨酸(cys2／cys2)锌离子形成配位键氨基酸间肤链成环状突出折迭成指形结构指结构常串联重复锌指族转录子二聚体形式DNA式调控元件结合
15游启动子元件 TATA框游保守序列称游启动子元件游激活序列
16Gene expression 指基转录RNA翻译蛋白质程表达产物包括mRNAtRNArRNA蛋白质肽
17RNAi RNA干扰（RNA interference RNAi）指进化程中高度保守双链RNA（doublestranded RNAdsRNA）诱发源mRNA高效特异性降解现象
二填空题
1 通基重排调节基活性典型例子免疫球蛋白结构基表达
2．哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见元件TATAGCCAAT应反式作蛋白子分TFIIDSP1CTFNF1
3．RNA聚合酶Ⅱ基转录子TFⅡATFⅡBTFIIDTFⅡE结合序：DABE
中TFIID功TATA盒结合
4．DNA结合转录子二聚体形式起作转录子DNA结合功域常见种螺旋转角螺旋锌指模体碱性亮氨酸拉链模体
5 典型锌指蛋白C2H2型Zn离子两Cys残基两His残基形成配位键类锌指蛋白C2C2型Zn离子四Cys残基形成配位键
三选择题
1 真核基表达调控中促进转录速率调控元件：B
A衰减子 B增强子 Crepressor DTATA box
2 述遗传信息流动程中生物分子参C
A复制 B转录 C翻译 D三者差
3．真核生物DNA中约27胞嘧啶存甲基化修饰绝数甲基化发生C二核苷酸
A．CC B CT C CG D CA
五简答题
1简述真核生物转录水调控机制？
真核生物转录水调控通反式作子式作元件RNA聚合酶相互作完成反式作子结合式作元件影响转录起始复合物形成程A转录起始复合物形成：真核生物RNA聚合酶识通转录子DNA形成蛋白质DNA复合物转录子结合DNA形成功启动子RNA聚合酶识结合转录起始复合物形成程：TFⅡD结合TATA盒RNA聚合酶识结合TFⅡDDNA复合物形成闭合复合物转录子RNA聚合酶结合形成开放复合物程中反式作子作：促进抑制TFⅡDTATA盒结合促进抑制RNA聚合酶TFⅡDDNA复合物结合促进抑制转录起始复合物形成B反式作子：般具三功域（DNA识结合域转录活性域结合蛋白结合域）识结合游调控区中式作元件基表达正性负性调控作3转录起始调控：⑴反式作子活性调节：A表达式调节——反式作子合成出具活性B价修饰——磷酸化磷酸化糖基化C配体结合——许激素受体反式作子D蛋白质蛋白质相互作——蛋白质蛋白质复合物解离形成⑵反式作子式作元件结合：反式作子激活识结合游启动子元件增强子中保守性序列基转录起调节作⑶反式作子作方式——成环扭曲滑动Oozing⑷反式作子组合式调控作：种反式作子结合式作元件然发挥促进抑制作反式作子基调控单子完成种子组合发挥特定作
2简述真核生物转录水调控机制？
⑴5端加帽3端聚腺苷酸化调控意义：5端加帽3端聚腺苷酸化保持mRNA稳定重素少保证mRNA转录程中降解
⑵mRNA选择性剪接基表达调控作
⑶mRNA运输控制
3cAMP信号转导途径？
1组成：胞外信息分子（胰高血糖素肾腺素促肾腺皮质激素）受体G蛋白ACcAMP PKA2途径：
v 信号分子受体结合引起受体构象变化
v 受体活化G蛋白
v 活化G蛋白激活腺苷酸环化酶（AC）
v AC催化ATP生成cAMP
v cAMP活化PKAPKA目标蛋白磷酸化调节代谢酶活性调节基表达
4什mRNA翻译起始密码子游必须含翻译核苷酸？
原核生物mRNA起始密码子(AUG)附（5＇方游）段长短等序含较嘌呤核苷酸称SD序核糖体亚基16SrRNA3＇端富含嘧啶核苷酸区域配结合助带甲酰甲硫氨酸起始tRNA识mRNA起始密码(AUG)肽链合成开始原核mRNA相似真核mRNA5＇端翻译区（前导序）中常段序核糖体亚基18SrRNA3＇端段序互补结合种结合真核mRNA翻译启动关
5原核生物真核生物启动子差？
原核生物
TTGACA TATAAT起始位点
35 10
真核生物
增强子GC CAATTATAA—5mGpp—起始位点
110 70 25
6较原核生物真核生物基组结构异指出真核生物细胞RNA含子剪接方式
答案点：重复序列情况含子外显子方面述剪接方式指GUAG AUAC类含子间接错误未找引源错误未找引源类含子间接方式
7较原核生物真核生物基表达调控异点
点两者转录水进行调控点原核生物转录翻译偶联操子调控现象普遍真核生物基表达复杂转录翻译分开转录细胞核进入细胞质调控较复杂DNA水转录水翻译水均存
8简述真核基表达调控中结合部位调控蛋白质间相互作方式
基游启动子元件组成转录子结合转录子通基础转录复合体作影响转录效率现已发现许转录子现象：DNA序列蛋白子识直接结合DNA序列蛋白子少数蛋白子间相互作数转录子通蛋白质－蛋白质间作DNA序列联系影响转录效率转录子间转录子DNA结合会引起构象变化影响转录效率
作蛋白质转录子功分析结构包含区域：
1）DNA结合域(DNA binding domain)60－100氨基酸残基组织亚区组成
2）转录激活域(activating domain)常30－100氨基酸残基组成结构域富含酸性氨基酸富含谷氨酰胺富含脯氨酸等种类酸性结构域见
3）连接区连接两结构域部分DNA直接结合转录子没DNA结合域通转录激活域直接间接作转录复合体影响转录效率
DNA结合转录子二聚体形式起作DNA结合功域常见种：
1）螺旋转角螺旋(helixturnhelix HTH)螺旋环螺旋(helixloophelixHLH) 类结构少两α螺旋间短肽段形成转角环连接两样motif结构二聚体形式相连距离正相DNA螺距(34nm)两α螺旋刚分嵌入DNA深沟
2）锌指(zinc finger) 结构图示重复指状结构约含23氨基酸残基锌4配价键4半胱氨酸2半胱氨酸2组氨酸相结合整蛋白质分子20样锌指重复单位单位指部伸入DNA双螺旋深沟接触5核苷酸例GC盒结合转录子SP1中连续3锌指重复结构
3）碱性－亮氨酸拉链(basic leucine zipper bZIP)该结构特点蛋白质分子肽链隔6氨基酸亮氨酸残基结果导致亮氨酸残基α螺旋方出现
两相结构两排亮氨酸残基疏水键结合成二聚体该二聚体端肽段富含碱性氨基酸残基正电荷DNA双螺旋链带负电荷磷酸基团结合形成二聚体DNA亲结合力明显降低肝脏肠皮脂肪细胞某脑细胞中称CEBP家族类蛋白质够CAAT盒病毒增强子结合特征形成bZIP二聚体结构
述见：转录调控实质蛋白质DNA蛋白质蛋白质间相互作构象变化正蛋白质核酸活表现生物分子间辨认相互作结构变化生命活动中意义认识研究起步阶段中许容甚重规律知努力探索
9．什说转录激活基表达调控基环节？
基表达级水调控中转录起始基表达调控限速步骤转录激活调节步骤特异性强涉面广包括DNA序列调节蛋白DNA蛋白质蛋白质蛋白质间相互作述素RNA聚合酶活性影响等
10．什真核生物中转录翻译法偶联？
真核生物转录发生细胞核翻译发生细胞质外转录初级产物需步加工进行翻译
11．反式作子DNA结合结构域结构模式种分写出结构特点
1)锌指结构
2)源结构域具螺旋回折螺旋结构
3)亮氨酸拉链结构两单体结合形成DNA结合域
4)螺旋环螺旋结构易形成二聚体螺旋区形成反式作子二聚体碱性氨基酸区结合DNA
5)碱性α螺旋含较碱性氨基酸转录复制子CTFNF1DNA结合区域具碱性α螺旋结构 含高密度碱性氨基酸锌指结构源结构域亮氨酸拉链结构
6）β折叠
12 型真核基结构
①编码序列—外显子
②插入外显子间非编码序列—含子
③5＇端3＇端非翻译区
④调控序列(位述三种序列中)
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