分子遗传学习题

分子遗传学题
1     谓操子试述原核生物基表达转录水调控
操子功相关联编码序列（2）游调控序列（包括操序列启动序列调节序列）等成簇串联起构成转录协调单位乳糖操子阿拉伯糖操子组氨酸操子色氨酸操子等
原核生物中基表达调控转录水调控调节基作操子单位转录出条反子mRNA指导蛋白质合成原核生物调节基产物作诱导蛋白阻遏蛋白相应效应物（诱导物阻遏物）结合改变启动子结合状态控制结构基转录数糖类代谢操子葡萄糖效应细胞cAMPCAP复合物促进基转录许氨基酸嘧啶合成操子衰减现象前导RNA 翻译状况直接控制结构基转录碳源饥饿环境恶劣时发生严紧反应量空载tRNA导致蛋白质合成空转反应合成魔斑物质导致量操子关闭芽孢形成噬菌体感染等程中发生σ子更原RNA聚合酶修饰失活等现象
2 简述真核生物基表达转录水调控
真核生物基转录调控式作元件反式作子相互作真核生物基转录独立进行启动子游元件结合种转录子转录子二聚体特定DNA位点结合募集种启动子组分形成转录起始复合物通激活域RNA聚合酶互作：通DNA次成环通中介蛋白作间转录抑制蛋白互作决定基转录状态具信号整合组合调控特点种子信号整合组合调控决定基表达样性染色体构型核体重构甲基化状态影响基活性状态抑制蛋白通种方式抑制基表达绝缘子限制增强子作范围活性跨基发挥作交剪接产生种剪接变异体许SR蛋白相应位点结合干扰剪接体装配该含子剪接DNA重排导致产生量蛋白质产物
mRNA修饰改变poly(A)长度调节活性寿命真核核糖开关改变mRNA稳定性转录状态剪接程RNA编辑miRNA许表观遗传现象范围调节种基表达
5 基文库构建方法应
基组文库构建基组太生物构建基组文库时常宿菌肠杆菌肠杆菌量扩增供体生物DNA片段某外源基获表达常载体质粒载体λ载体COS质粒载体整构建程包括步骤：
1)  供体DNA分离纯化限制酶切
完整基片段机DNA片段常采识4核苷酸限制酶MboISau3AI供体DNA进行部分酶切片段采载体种类定两种限制酶产生较机DNA片段毕竟识序列特异获完全机DNA片段获完全机DNA片段方法利机械剪切法机械剪切力作DNA分子位点处发生断裂种方法获DNA片段需系列DNA末端修饰载体DNA分子相连
2)  载体DNA分离纯化限制酶切脱磷酸化
果供体DNA采MboI部分酶切载体DNA采BamHI完全酶切脱磷酸化两种酶产生末端相容
3)  重组DNA分子形成
a供体载体DNA定克分子率连接起构建基组文库时采分子克隆载体种类样求重组DNA分子形成时环状线状质粒载体言重组DNA分子应环状λ载体COS质粒载体言重组DNA分子应该线状
4)  重组DNA分子导肠杆菌细胞
载体质粒型采直接转化法载体入COS质粒重组DNA分子先进行体外包装形成噬菌体颗粒然感染肠杆菌细胞直接保存噬菌体颗粒作基组文库收集转化菌落噬菌体颗粒构建成基组文库重组DNA
分子进入受体细胞转化细胞常常定条件增殖重组DNA分子着细胞生长增殖程量增加插入载体中外源DNA片段原拷贝扩千拷贝程称基组文库扩增基组文库扩增程中供体DNA分子中某片段会扩增重组DNA分子中插入外源基产生某种宿细胞害产物终导致细胞死亡基组文库扩增基筛选程中应考虑种性
5)  基组文库规模质量评估
基组文库质量高低直接影响目基筛选效率基组文库质量包括重组频率重组子数目重组频率越高目基筛选工作量越重组子数目越筛选目基机率越合格基组文库必须包含某种生物全部遗传信息基组文库应少克隆满足求呢利式计算出基组文库：N二ln(1p)／In(1f)式中N重组DNA克隆数p需概率f重组基DNA分子中插入片段均长度(bp计)某种生物DNA总长度(bp计)式中知基组文库需概率插入DNA片段长度关果求某特定DNA片段文库中出现概率越高基组文库越构建基组文库工作量增加确保基组文库中应含某种感兴趣DNA片段时增加工作量数情况p选择0．99插入片段根某种生物基组决定基组越插入载体中DNA片段长降低基组文库规模减轻目基筛选工作量
基组生物言质粒载体入载体COS质粒载体构建基组文库插入片段较基组规模会获更插入DNA片段酵母工染色体载体常构建基组文库称工染色体库(YAC库)构建工染色体库程较复杂求技术水高构建工染色体程中DNA片段制备足特殊：动物细胞先包埋琼脂糖凝胶中通原位裂解方法细胞中DNA释放出然限制酶原位酶切采脉场凝胶电泳方法分子
DNA分离凝胶中DNA纯化出载体相连基枪重组DNA导入酵母细胞中
 
11   概述病毒分子生物学研究进展（HIV）
分子病毒学（molecular virology）病毒学分子生物学相互渗透融合形成门学科门研究病毒基组结构功探寻病毒基组复制基表达调控机制揭示病毒感染致病分子质病毒基工程疫苗抗病毒药物研制病毒病诊断预防治疗提供理基础科学
分子病毒学形成发展致历四时期病毒发现时期病毒化学时期细胞水研究时期分子病毒学研究时期分子病毒学四时期发展已成门成熟学科
分子病毒学研究容分六部分
1．病毒基组结构功
研究病毒基组结构功探明病毒基组核苷酸组成排列序弄清基组中开放阅读框架（ORF）数量位置功深入解病毒基组中重复序列元件调节元件病毒基表达基组复制影响阐明病毒结构基调节基编码产物病毒复制循环中作细胞基编码产物相互关系等
2．病毒基表达调控原理
病毒基表达包括转录翻译两程病毒基表达调控研究涉病毒转录调控元件理解病毒细胞调节子调节蛋白功性分析尤通病毒增强子启动子衰减子转座子等调控元件研究仅阐明病毒基表达调控原理极丰富分子生物学容进步加深原核生物真核生物基表达调控原理认识解
3．病毒感染分子机制
病毒感染质言种分子感染感染机制研究包括解病毒吸附侵入释放等感染循环特点包括阐明病毒致病宿产生免疫分子机制关领域研究容涉病毒吸附蛋白宿细胞受体蛋白相互识作病毒急性感染持续感染（潜伏感染）发生机理特病毒持续感染程中产生非杀细胞感染病毒逃逸宿免疫识作机制
4．抗病毒活性物质
抗病毒肽物质中干扰素研究清楚外重组克隆生产淋巴子IL1IL2肿瘤坏死子（tumor necrosis factorTNF）等具较强抗病毒活性年反义RNA（antisense RNA）核酶（ribozyme）抗病毒作受广泛重视
5．病毒基工程疫苗
目前选择适合动物病毒作载体进行蛋白质糖基化哺乳动物培养细胞作表达系统基工程疫苗研制方利痘苗病毒构建重组载体哺乳动物细胞中表达生产出具高活性病毒基工程疫苗
6．病毒致癌分子机理
动物肿瘤形成遗传种素关外肿瘤病毒肿瘤发生发展重诱
外病毒蛋白抗原决定簇活性位点鉴定病毒载体构建利现代分子生物学技术（PCR等）分子病毒学诊断手段病毒病诊断检出新病毒发现等分子病毒学研究范畴
分子病毒学作门极具潜力学科采现代分子生物学新理新技术新方法研究病毒病毒宿间关系生物学中作活跃领域类发展做出贡献
 

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