实验室风险评估风险控制程序
检验职业感染现状
血呼吸道粘膜传播疾病直接危害着检验工作者身体健康国HBV感染高发区约13亿携带HBVHBV表面抗原(HBsAg)携带率82090年代HCV感染呈升趋势感染率3目前艾滋病感染国流行已进入增长期偿献血群中检出乙型肝炎丙型肝炎梅毒艾滋病等病毒感染占定例调查显示针头玻璃碎片锐器致伤子常接触针头者发生锐器伤危险常接触者23倍种传染病通血液传染血液检验中职业暴露数实验室工作员实验操作标采集程中意外带病原体血液污染破损皮肤病原体感染针头血常规采血针采血玻璃吸头等锐器刺破皮肤呼吸道吸入气溶胶传播方式检验员面着严峻职业暴露危险
1传播途径
检验员感染疾病般传染途径
(1)皮肤破损带HIVHBVHCV梅毒等病原体血液长时间接触伤口溃疡擦伤等破损皮肤会造成机体感染
(2)穿刺针头刀片等皮肤意外损伤带病毒全血血清血浆进入皮循环系统造成感染种针头意外损伤职业性HBVHIV感染重原带HIV针头意外穿刺皮肤HIV感染性009间均04HBV性630间均18学者进行相应统计推算1000艾滋病病年会产生1例针头意外造成职业性HIV感染1000乙肝患者年会产生45例类似职业性HBV感染HBV群中感染率HIV高定群中年产生针头意外造成职业性HBV感染HIV
(3)粘膜试未封闭离心意外等造成血液飞溅带病原体血液口腔鼻腔黏膜眼结膜等接触造成感染HIVHBVHCV梅毒等病原体污染电话仪器工作台面等接触造成感染
(4)吸入含病原体气溶胶引起感染采血窗口发放化验单时直接病面面接触交谈易感染呼吸道疾病外引起气溶胶操作事离心溢出溅洒混合混旋研磨超声开瓶时两界面分离等
2危害素
(1)血源性危害调查研究发现检验员针刺伤占第2位常见危害较职业传染病3种:
1)乙型肝炎 HBV检验员面传播危险性血源性疾病HBV血液中浓度高达108109拷贝ml检验员感染率较高HBV传播途径血液传播病毒携带者血液中HBV浓度高针刺伤时需0004ml带HBV血液足受伤者感染HBV
2)丙型肝炎丙肝病毒(HCV)血液中浓度102103ml左右血液传播通注射针刺含HCV血液污染伤口密切接触传播丙型肝炎数患者症状明显容易发现表现流感样症状时会造成HBV更严重果 3)艾滋病(AIDS)年国AIDS流行检验员造成日益严峻职业性感染威胁HIV血液中浓度通常100104拷贝mlHIV污染锐器刺伤感染率03美国疾病控制中心新资料显示截止2000年底美国医护员中已57确诊感染HIV中实验室技术员19
(2)呼吸道接触节肢动物叮咬危害素
病原微生物感染:病原微生物实验室特高致病性病原微生物实验室操作疏忽失误造成难弥补损失常见感染:结核分枝杆菌肠道致病菌等
3.防护措施
(1)增强检验工作员防护意识防护行:限度减少危害检验工作员应动方面解关HBVHCVHIV等相关知识解种病毒传播方式知道采取什样防护措施医院检验科应高度重视定期加强教育检验工作员意识防护重性觉养成良惯
(2)规范操作程序:类医疗废物垃圾必须分类放置时消毒卫生清洁员取走特注意损伤性医疗废物时处理严格防止感染致病子外泄污染环境严格规章制度养成良工作惯检验科应制定套关卫生防护规章制度应觉遵守实验室禁止吸烟吃东西接听手机免疫学检验室细菌室工作戴口罩手套防止种液体飞溅必需避免手皮肤直接接触意外污染应时消毒洗擦干飞溅出液体离心机停止转动前时开顶盖减少气溶胶产生更手离心机减速避免机械损伤发生
(3)避免锐器损伤熟练掌握锐利器械:感染性种针吸吸头试玻片等时放专容器针头套回针帽避免刺伤锐器损伤立挤出伤口处血液肥皂水流水清洗伤口2碘伏消毒纱布包扎套橡皮指套
(橡皮手套)班前洗手重新消毒包扎准确记录报确认损伤器械否传染性疾病患者受伤者时监测治疗
(4)重视手部清洁:院感染病原体传播媒介污染手戴医乳胶手套医务员提供保护乳胶手套避免针头造成机械损伤程度减少皮肤血液接触针头造成意外损伤乳胶手套起种阻挡封闭作减少进入伤口血量降低感染正确洗手方法手表面暂居菌减少1000倍普通肥皂清水擦揉15s清暂居菌降低皮肤密度搓洗15s手表面金黄色葡萄球菌降77洗2分钟降低85铜绿假单胞菌效果更搓洗12s便92洗2分钟978
(5)职业暴露局部处理:工作中职业暴露现场急救处理非常重黏膜暴露应生理盐水清水反复洗干净皮肤意外接触血液等污染物应立肥皂清水洗血液污染针头仪器等锐器刺伤伤口进行轻轻挤压挤出损伤处血液肥皂流水清洗伤口70酒精0205氧乙酸05碘伏等浸泡涂抹消毒包扎伤口带手套等发生意外伤害暴露立进行伤口局部处理立报告预防保健部门受伤者患者进行HBVHCVHIV梅毒等检测检测结果快采取相应补救措施减少职业感染率发生
二实验室风险评估目
风险评估目确定实验室防护等级建立生物安全防护机制配备适防护品采取相应防护措施
评估范围科室涉病原微生物化学物理辐射电气水灾火灾然灾害噪音等进行风险评估科室理机构统筹安排
评估结十分明确包括危险程度极低微生物
根实验室工作特点仪器包评估
危害性评估始实验室设计建造前实施实验活动中需进行定期阶段性评估
发生实验室意外新发传染病严重疫情时应特注意安排项工作
紧急意外事应方案提供操作规范:
1 防备火灾洪水震爆炸等然灾害
2 意外暴露处理污染清
3 意外事发生时继续操作员紧急撤离
4 员暴露受伤紧急医疗处理医疗监护床处理流行病学调查
三风险评估容
()生物子危害评估
生物子(biological agents)概念:引起感染敏中毒微生物体包括基修饰细胞培养寄生体
(1)危害评估容包括生物子已知未知特性生物子种类源传染性传播途径易感性潜伏期剂量-效应关系致病性变异性环境中稳定性生物环境交互作流行病学资料预防治疗方案等
(2)制定评估报告:种素风险发生概率程度针风险采取预防措施风险发生补救方法
2006年1月11日中华民国卫生部颁布间传染病原微生物名录医院检验科接触病原体进行评估
表1 细菌放线菌衣原体支原体立克次体螺旋体病毒分类名录
举例:
1金黄色葡萄球菌生物危害评估报告
()金黄色葡萄球菌传播致病
金黄色葡萄球菌然界中处空气水灰尘动物排泄物中找金黄色葡萄球菌流行病学般特点:季节分布见春夏季中毒食品种类奶肉蛋鱼制品外剩饭油煎蛋糯米糕凉粉等引起中毒事件报道呼吸道感染患者鼻腔带菌率83畜化脓性感染部位常成污染源
金黄色葡萄球菌类化脓感染中常见病原菌引起局部化脓感染引起菌血症肺炎伪膜性肠炎心包炎骨髓炎等甚败血症脓毒症等全身感染金黄色葡萄球菌致病力强弱取决产生毒素侵袭性酶外金黄色葡萄球菌产生溶表皮素明胶酶蛋白酶脂肪酶肽酶等
(二)金黄色葡萄球菌生物学特性
典型金黄色葡萄球菌球型直径08μm左右显微镜呈单成双排列成葡萄串状芽胞鞭毛数荚膜革兰氏染色阳性衰老死亡白细胞吞噬菌体革兰染色呈阴性菌营养求高普通培养基生长良需氧兼性厌氧
适生长温度35~37℃适pH74~76
金黄色葡萄球菌高度耐盐性1015NaCl肉汤中生长分解葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖产酸产气甲基红反应阳性VP反应弱阳性许菌株分解精氨酸水解尿素原硝酸盐液化明胶
金黄色葡萄球菌具较强抵抗力磺胺类药物敏感性低青霉素红霉素等高度敏感
(三)金黄色葡萄球菌检测诊断
1标采集采感染部位种标包括血液脑脊液穿刺液痰液脓液创伤分泌物尿液粪便呕吐物等
2直接涂片镜检直接涂片检查正常情况呈菌状态体液标血液脑脊液穿刺液等检出革兰氏阳性显微镜呈葡萄状排列芽胞荚膜直径051μm 球菌具重床价值
3分离培养选普通营养琼脂板血板高盐甘露醇板血板葡萄糖肉汤增菌培养基该菌普通肉汤中呈均匀迅速混浊生长接种琼脂板35℃夜形成直径约2~3mm厚菌落湿润光泽呈金黄色透明圆形凸起接种血板菌落周围形成明显透明β—溶血环高甘露醇板金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色菌落凝固酶阴性葡萄球菌相鉴
4鉴实验
(1)血浆凝固酶试验:血浆凝固酶分结合型游离型前者结合细菌细胞壁直接作血浆中纤维蛋白原转化纤维蛋白环绕菌体形成凝块游离型血浆凝固酶产生分泌菌体外直接作纤维蛋白原激活血浆凝血酶原转化成凝血酶者作纤维蛋白原转化纤维蛋白具体测量方法分玻片法试法两种
(2)耐热核酸酶试验:24时肉汤培养物沸水浴处理15min接种环划线刺种甲苯胺兰DNA板35℃培养24时刺种线周围出现淡粉色者阳性试验金黄色葡萄球菌阳性
(3)甘露醇发酵实验金黄色葡萄球菌发酵甘露醇
(4)Staphaurex 胶乳凝集实验鉴定金黄色葡萄球菌种快速简便商品化直接凝集试验
5生化鉴定述注意凝固酶阳性葡萄球菌鉴点:PYR(吡咯烷酮β萘基酰胺)试验阴性VP试验阳性鸟氨酸脱羧酶试验阴性
6免疫学方法酶联免疫吸附试验流免疫电泳方法检测金葡菌磷壁酸抗体
7分子生物学方法包括PFGE脉场凝胶电泳酶切图谱分析等
(四)金黄色葡萄球菌防治生物安全防护
1细菌防治
(1)金黄色葡萄球菌控制包括:
1)防止金黄色葡萄球菌污染食品防止带菌群种食物污染
2)防止金黄色葡萄球菌肠毒素生成
3)菌措施(检查病前彻底洗手消毒合器械)关重症状鼻腔带菌者非带菌株十分危险怀疑暴发流行传染源般必隔离
治疗包括脓肿引流抗生素(重症病需肠外药)全身支持疗法培养标应开始治疗前更换抗生素前获取抗生素选择剂量取决感染部位疾病严重程度细菌药物敏感性
医院获葡萄球菌数社区获菌株通常青霉素G氨苄青霉素抗假单胞菌青霉素耐药性数菌株耐青霉素酶青霉素头孢菌素亚胺培南类庆霉素万古霉素考拉宁林霉素氯林霉素敏感
目前耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增MRSA菌株通常耐β酰胺酶青霉素头孢菌素卡巴培南类耐药性细菌氨基糖苷类环酯类(红霉素克拉霉素阿齐霉素林霉素氯林霉素)耐药性普遍
然亚胺培南西拉司丁喹诺酮类某MRSA感染效静脉注射万古霉素首选肾功正常成通剂量6时静脉注射500mg12时静滴注1000mg少1时滴完肾功受损时剂量应根血清中药物浓度加调整疗程视感染部位病反应定般2~4周某严重发症感染需静脉药治疗6~8周然口服治疗1月更长时间
代万古霉素治疗MRSA感染药物:TMPSMZ成剂量TMP10~15mg (kgd)加SMZ50~75mg(kgd)分剂口服肠外药次间隔8时12时连续2~4周利福(600mgd)口服肠外药肠外亚胺培南西拉司丁(500mg6时1次)美罗匹宁(05~10g8时1次利福单独应细菌易产生抗药性治疗异物相关性MRSA感染浆膜腔MRSA感染时利福氨基糖苷类辅助药物邻氯青霉素双氯青霉素TMPSMZ环丙沙星局部莫匹罗星(mupirocin)治疗MRSA 带菌状态MRSA药物产生抗药性抗万古霉素肠球菌(VRE)菌株流行日益增加种菌株实验室中引起抗万古霉素基转凝固酶阳性金黄色葡萄球菌
菌株感染病中转变凝固酶阴性葡萄球菌分离株葡萄球菌容易治疗类感染药物产生抗药性杆菌肽话试治疗抗万古霉素葡萄球菌感染病应严格隔离防细菌传播
2细菌生物安全防护
根病原微生物生物实验室生物安全理条例中关规定间传播微生物名录(颁布)金黄色葡萄球菌属三类BSL2相关防护事宜包括:
(1)操作求
1)实验时未实验室意限制禁止进入实验室
2)许工作区域饮食吸烟清洗隐型眼镜化妆食物应存放工作区域外专橱柜冰箱中
3)操作程应量细心避免产生溅出气溶胶
4)污染锐器必须时刻保持高度警惕包括针注射器玻片加样器等
5)注射吸取感染材料时针头固定注射器次性注射器(注射器针头体)次性针头必须弯曲切断破碎重新套针头套次性注射器掉丢弃前进行工处理心放入会刺穿收集废弃锐器容器中非次性锐器必须放置坚壁容器中转移处理区消毒高压杀菌6)碎器皿直接手处理必须工具处理刷子簸箕夹子镊子盛污染针头锐器碎玻璃容器倒掉前应相关规定进行消毒
7)培养物储存物规定废物释放前均应行消毒方法进行消毒高压灭菌转移实验室消毒物料应置耐防漏容器密封运出实验室离开该系统进行消毒物料转移前应包装包装应符合关法规
8)溅出偶然事件中明显暴露传染源时立实验室报告进行适医学评估观察治疗保留书面记录
9)日常程序关传染源工作结束尤传染源溅出洒出受传染源污染实验室设备工作台面应效消毒剂消毒污染设备送修理维护前相关规定消毒离开设施转移前相关规定包运输(2)安全设备
1)正确保养生物安全柜二级生物安全柜合适员防护设施物理遏制装置
2)确定形成传染性气溶胶溅出物实验程包括离心研磨匀浆剧烈震荡混匀超声波破裂开启装传染源容器采集感染标等
3)涉高浓度体积传染源时选密封转头带安全罩离心机转头安全罩仅生物安全柜中开开放实验室离心
4)必须生物安全柜外处理标时需采取面部保护措施(镜口罩面罩防溅装置)免传染源害物溅洒面
5)实验室必须专防护性外衣褂罩衫制服员非实验室区域时防护服必须留实验室防护服实验室处理洗衣房中洗涤带回家中
6)接触潜传染源污染表面设备时戴手套次性手套清洗重复接触洁净表面(键盘电话等)应戴着实验室外备带滑石粉乳胶手套脱掉手套洗手
(二)实验室工作岗位风险评估
例:1标运送岗位
2免疫(HIV)检测岗位
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