标题：ABO血型鉴定作业指导书
版号：A
修订号：0
文件编号：JAZYYLJSOP018
发布日期：2006年06月06日
生效日期：2006年07月01日
发布部门：理层
编制：***
审核： **
批准（签字）：
页码：第 1 页 5 页
ABO血型鉴定(玻片法)标准操作程序
1 检验目
鉴定ABO血型仅某种具体疾病诊断治疗母婴ABO血型合引起新生溶血病输血器官移植具重意义(受者供者ABO血型必须完全符合输血移植)
2 检测原理
红细胞血型抗原相应抗体特异结合发生凝集反应通正反定型试验确定ABO血型正定型已知抗A抗B分型血清测定红细胞相应A抗原（）B抗原反定型已知A抗原B抗原红细胞测定血清中相应抗A （）抗B抗体
3 性参数
红细胞血型鉴定定性试验目前没测定性指标
4 标
41 抽取患者静脉血标3mL置紫色瓶盖真空试（含EDTAK2抗凝剂）
42 采血应立送检科血型室
43 样品收立分离血浆（备反定）时鉴定血液标应存2~8℃冰箱保存
44 严重溶血脂血标测定
5 设备试剂
51 血型定型试剂：标准抗血清标准血球（长春生物制品研究）
52 血型定型试剂应存放2～8℃冰箱保存
53 标准血球前必须颠倒彻底混匀超失效期试剂
54 清洁次性塑料试（配患者5红细胞盐水悬液分离患者血浆标）
6 容器添加剂
采集血样次性含EDTAK2抗凝剂真空试(紫色盖)
7 试剂鉴定步骤
批试剂必须做效价亲力特异性测定
71 标准血清效价滴定
711 取清洁干燥次性塑料试分标明AB排标明稀释倍数24……264
712 加生理盐水02mL
713 第排第加标准抗B血清02mL第二排第加标准抗A血清02mL
714 分吸第溶液吸放3次混均吸02mL第二混均次连续稀释第8混均弃02mL加血清作盐水
715 分加入相应2红细胞悬液02mL第排加B型红细胞第二排加A型红细胞
716 试架振摇混均置室温时肉眼观察结果应凝集现象抗A效价应低1：128抗B低1：64合格
72 标准血清亲力试验
取清洁玻片1块分标明抗A抗B取相应标准血清05mL放置标记处吸取10相应红细胞盐水悬液01mL置血清旁摇动玻片血清红细胞混合时开始记时记录开始出现凝集时间3min时观察凝块抗血清亲力15s开始凝集3min时凝块达1mm2者合格
73 标准血清特异性测定
731 意取10名O型红细胞1名A型B型红细胞分配成5红细胞盐水悬液
732 取清洁次性试12支加受检标准抗血清1滴第1~第10分加O型红细胞悬液1滴第11加入A型红细胞悬液1滴第12加入B红细胞悬液1滴混匀置室温1h观察结果
733 果受检血清10O型红细胞型红细胞凝含相应抗原红细胞凝集特异性合格
74 标准血球特异性亲力测定
标准血球试剂鉴定合格标准血清做特异性测定亲力试验方法：
741 取4支清洁次试加鉴定合格标准血清抗A机取4盒新标准血球A血球分加入4支试混匀室温1h观察结果
742 取4支清洁次性试加鉴定合格标准血清抗B机取4盒新标准血球B血球分加入4支试混匀室温1h观察结果
743 果出现特异性凝集特异性合格
744 亲力参血清方法
8 操作步骤
81 5红细胞盐水悬液配制：取患者压积红细胞1滴加08mL（16滴）盐水患者血配制成5红细胞悬液
82正定型：取试2支分标明抗A抗B分加入标准抗A抗B血清2滴加受检者5红细胞悬液2滴离心1000rpm分钟先观察试中清液否溶血然轻摇试肉眼显微镜观察否凝集表报告结果
83反定型：取试3支分标明ABO分加入5标准ABO型红细胞悬液2滴加受检者血清2滴离心1000rpm分钟先观察试中清液否溶血然轻摇试肉眼显微镜观察否凝集表报告结果
ABO血型正反定型结果判断 （+凝集凝集）
分型血清+受检者红细胞
受检者血型
受检者血清+标准红细胞
抗A血清 抗B血清
A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞
+
+
+ +
A
B
O
AB
+
+
+ +
9 质量控制措施
外购标准血清标准红细胞分作特异性效价亲力鉴定
10 干扰素
冷凝集：该试验应常温进行防冷凝脂血溶血
11 结果计算测量确定度
红细胞血型鉴定结果计算测量确定度
12 生物参考区间
红细胞血型存生物参考区间
13 患者检验结果报告区间
红细胞血型鉴定患者检验结果报告区间A型B型AB型O型
14 警告危急值
红细胞血型鉴定警告危急值
15 实验室解释
ABO血型中某种抗原相应天然抗体血型检查重性某种具体疾病诊断治疗：
151 输血：血液类赖生存重成分循环血量足血细胞减少（失血贫血等）均会发生许床症状甚危生命时输血治疗抢救生命重措施输血前必须检查血型选择血型相供血者进行交叉配血完全相合输血
152 母婴ABO血型合引起新生溶血病血型血清学检查诊断
153 器官移植时受者供者必须ABO血型相符移植血型符极易引起急性排异反应导致移植失败
16 安全防护措施
血型检验程中穿工作衣带防护口罩手套严格操作规程检验结束02氧乙酸溶液擦拭实验台显微镜手柄载物台等
17 变异潜源
171 新生年老体弱者ABO血型抗体反应较弱观察结果时力摇动免弱凝集散开呈阴性结果
172 新鲜血清中补体存抗体相应抗原结合发生溶血观察结果时发现溶血现象镜红细胞减少趋意义凝集相表现配血合
173 红细胞血清细菌病毒污染出现细菌性凝集
174 患者未产生ABO抗体抗体抑制种情况见①新生4～6月婴反定型时凝集凝集弱新生抗体母亲反定意义②年龄增长老年抗体水降：③白血病淋巴瘤免疫抑制药物患者④骨髓移植患者等
175 检红细胞异常 ①弱A弱B亚型②白血病时AB抗原减弱误定O型③霍奇金病类似白血病情况④获性B获性A表现等
176 检者血浆成分异常 ①某疾病发性骨髓瘤霍奇金肉瘤时血浆纤维蛋白原水升高易形成串状物外观类似凝集②应血浆扩溶剂低分子右旋糖酐胰腺癌等血浆溶性血型物质中试剂中抗A抗B
18 报告发送时间标保存
181 普通鉴定标日午4点发出报告急诊标特殊疑难血型时接标40分钟报告鉴定结果
182 血型标鉴定标保留二周
19 参考文献
1 叶应妩 王毓三编 全国床检验操作规程 中华民国卫生部医政司 南京 第二版 1997
2床基础检验学（全国医学专科学校教材民卫生出版社）
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修订号：0
文件编号：JAZYYLJSOP018
发布日期：2006年06月06日
生效日期：2006年07月01日
发布部门：理层
编制：***
审核： **
批准（签字）：
页码：第 1 页 5 页
ABO血型鉴定(玻片法)标准操作程序
1 检验目
鉴定ABO血型仅某种具体疾病诊断治疗母婴ABO血型合引起新生溶血病输血器官移植具重意义(受者供者ABO血型必须完全符合输血移植)
2 检测原理
红细胞血型抗原相应抗体特异结合发生凝集反应通正反定型试验确定ABO血型正定型已知抗A抗B分型血清测定红细胞相应A抗原（）B抗原反定型已知A抗原B抗原红细胞测定血清中相应抗A （）抗B抗体
3 性参数
红细胞血型鉴定定性试验目前没测定性指标
4 标
41 抽取患者静脉血标3mL置紫色瓶盖真空试（含EDTAK2抗凝剂）
42 采血应立送检科血型室
43 样品收立分离血浆（备反定）时鉴定血液标应存2~8℃冰箱保存
44 严重溶血脂血标测定
5 设备试剂
51 血型定型试剂：标准抗血清标准血球（长春生物制品研究）
52 血型定型试剂应存放2～8℃冰箱保存
53 标准血球前必须颠倒彻底混匀超失效期试剂
54 清洁次性塑料试（配患者5红细胞盐水悬液分离患者血浆标）
6 容器添加剂
采集血样次性含EDTAK2抗凝剂真空试(紫色盖)
7 试剂鉴定步骤
批试剂必须做效价亲力特异性测定
71 标准血清效价滴定
711 取清洁干燥次性塑料试分标明AB排标明稀释倍数24……264
712 加生理盐水02mL
713 第排第加标准抗B血清02mL第二排第加标准抗A血清02mL
714 分吸第溶液吸放3次混均吸02mL第二混均次连续稀释第8混均弃02mL加血清作盐水
715 分加入相应2红细胞悬液02mL第排加B型红细胞第二排加A型红细胞
716 试架振摇混均置室温时肉眼观察结果应凝集现象抗A效价应低1：128抗B低1：64合格
72 标准血清亲力试验
取清洁玻片1块分标明抗A抗B取相应标准血清05mL放置标记处吸取10相应红细胞盐水悬液01mL置血清旁摇动玻片血清红细胞混合时开始记时记录开始出现凝集时间3min时观察凝块抗血清亲力15s开始凝集3min时凝块达1mm2者合格
73 标准血清特异性测定
731 意取10名O型红细胞1名A型B型红细胞分配成5红细胞盐水悬液
732 取清洁次性试12支加受检标准抗血清1滴第1~第10分加O型红细胞悬液1滴第11加入A型红细胞悬液1滴第12加入B红细胞悬液1滴混匀置室温1h观察结果
733 果受检血清10O型红细胞型红细胞凝含相应抗原红细胞凝集特异性合格
74 标准血球特异性亲力测定
标准血球试剂鉴定合格标准血清做特异性测定亲力试验方法：
741 取4支清洁次试加鉴定合格标准血清抗A机取4盒新标准血球A血球分加入4支试混匀室温1h观察结果
742 取4支清洁次性试加鉴定合格标准血清抗B机取4盒新标准血球B血球分加入4支试混匀室温1h观察结果
743 果出现特异性凝集特异性合格
744 亲力参血清方法
8 操作步骤
81 5红细胞盐水悬液配制：取患者压积红细胞1滴加08mL（16滴）盐水患者血配制成5红细胞悬液
82正定型：取试2支分标明抗A抗B分加入标准抗A抗B血清2滴加受检者5红细胞悬液2滴离心1000rpm分钟先观察试中清液否溶血然轻摇试肉眼显微镜观察否凝集表报告结果
83反定型：取试3支分标明ABO分加入5标准ABO型红细胞悬液2滴加受检者血清2滴离心1000rpm分钟先观察试中清液否溶血然轻摇试肉眼显微镜观察否凝集表报告结果
ABO血型正反定型结果判断 （+凝集凝集）
分型血清+受检者红细胞
受检者血型
受检者血清+标准红细胞
抗A血清 抗B血清
A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞
+
+
+ +
A
B
O
AB
+
+
+ +
9 质量控制措施
外购标准血清标准红细胞分作特异性效价亲力鉴定
10 干扰素
冷凝集：该试验应常温进行防冷凝脂血溶血
11 结果计算测量确定度
红细胞血型鉴定结果计算测量确定度
12 生物参考区间
红细胞血型存生物参考区间
13 患者检验结果报告区间
红细胞血型鉴定患者检验结果报告区间A型B型AB型O型
14 警告危急值
红细胞血型鉴定警告危急值
15 实验室解释
ABO血型中某种抗原相应天然抗体血型检查重性某种具体疾病诊断治疗：
151 输血：血液类赖生存重成分循环血量足血细胞减少（失血贫血等）均会发生许床症状甚危生命时输血治疗抢救生命重措施输血前必须检查血型选择血型相供血者进行交叉配血完全相合输血
152 母婴ABO血型合引起新生溶血病血型血清学检查诊断
153 器官移植时受者供者必须ABO血型相符移植血型符极易引起急性排异反应导致移植失败
16 安全防护措施
血型检验程中穿工作衣带防护口罩手套严格操作规程检验结束02氧乙酸溶液擦拭实验台显微镜手柄载物台等
17 变异潜源
171 新生年老体弱者ABO血型抗体反应较弱观察结果时力摇动免弱凝集散开呈阴性结果
172 新鲜血清中补体存抗体相应抗原结合发生溶血观察结果时发现溶血现象镜红细胞减少趋意义凝集相表现配血合
173 红细胞血清细菌病毒污染出现细菌性凝集
174 患者未产生ABO抗体抗体抑制种情况见①新生4～6月婴反定型时凝集凝集弱新生抗体母亲反定意义②年龄增长老年抗体水降：③白血病淋巴瘤免疫抑制药物患者④骨髓移植患者等
175 检红细胞异常 ①弱A弱B亚型②白血病时AB抗原减弱误定O型③霍奇金病类似白血病情况④获性B获性A表现等
176 检者血浆成分异常 ①某疾病发性骨髓瘤霍奇金肉瘤时血浆纤维蛋白原水升高易形成串状物外观类似凝集②应血浆扩溶剂低分子右旋糖酐胰腺癌等血浆溶性血型物质中试剂中抗A抗B
18 报告发送时间标保存
181 普通鉴定标日午4点发出报告急诊标特殊疑难血型时接标40分钟报告鉴定结果
182 血型标鉴定标保留二周
19 参考文献
1 叶应妩 王毓三编 全国床检验操作规程 中华民国卫生部医政司 南京 第二版 1997
2床基础检验学（全国医学专科学校教材民卫生出版社）
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