附件1
基细胞荧光原位杂交法类染色体异常
检测试剂注册技术审查指导原
指导原旨指导注册申请基细胞荧光原位杂交法（Fluorescence In Situ HybridizationFISH）类染色体异常检测试剂注册申报资料准备撰写时技术审评部门审评注册申报资料提供参考
指导原基细胞荧光原位杂交法类染色体异常检测试剂般求申请应产品具体特性确定中容否适适需具体阐述理相应科学产品具体特性注册申报资料容进行充实细化
指导原供申请审查员指导性文件包括注册审批涉行政事项作法规强制执行果够满足相关法规求方法采需提供详细研究资料验证资料相关员应遵循相关法规前提指导原
指导原现行法规标准体系前认知水制定着法规标准断完善科学技术断发展指导原相关容适时进行调整
适范围
指导原述染色体异常类型包括染色体数目异常结构异常（包括异位倒位导致基断裂融合）扩增缺失等例产前羊水细胞中染色体数目异常白血病患者骨髓细胞中BCRABL基融合等
检测类染色体异常方法染色体核型分析原位杂交法PCR法高通量测序法等方法检测染色体异常类型片段操作求等方面具特点指导原适需进行注册审批方市采荧光原位杂交法检测类细胞样中染色体异常检测试剂荧光原位杂交法指根碱基互补配原目标DNA配核酸片段标记荧光染料（探针）该探针检样中相应核酸片段定条件特异结合（杂交）形成双链核酸助荧光显微镜观察记录形成杂交双链类型数量处染色体区带位置判断检样中否存染色体异常检测方法指导原基荧光原位杂交法撰写成显色原位杂交法银增强原位杂交法等亮视野原位杂交法适
指导原适样类型类细胞样适石蜡包埋细胞学组织学切片进行检测试剂微生物检测试剂
文针采荧光原位杂交法检测类细胞样中染色体异常检测试剂通指导原申请应结合具体产品特点进行注册申报果申报产品具体指导原应执行
指导原适进行产品注册相关许事项变更产品包括申报资料中部分项目求未事宜应符合体外诊断试剂注册理办法（国家食品药品监督理总局令第5号简称办法）等相关法规求
二注册申报资料求
注册申报资料撰写应符合关公布体外诊断试剂注册申报资料求批准证明文件格式公告（国家食品药品监督理总局公告2014年第44号）（简称2014年第44号公告）相关求容包括：
（）综述资料
1产品预期途描述产品预期途预期途相关床背景情况说明检测位点靶序列（Target SequenceTS）包括靶序列长度异常类型特异性信息说明相关床适应症该异常适应症中发生情况频率适应症发生率适群等说明具体床意义例：否诊断分型治疗方案选择预判断微量残留病监测等介绍相关床实验室诊断方法
2产品描述描述产品采技术原理包括杂交反应信号结果描述原材料源制备方法生产工艺程参考品制备确认方法
3关生物安全性方面说明
4关产品研究结果总结评价
5包括类产品国外批准市情况类产品采技术方法检测位点样类型荧光信号标记床应等进行分析阐明申请注册产品国外类产品优势局限性新研制体外诊断试剂产品需提供测物预期床适应症间关系文献资料
（二）原材料研究资料
应提供原材料源选择制备程质量分析质量控制标准等研究资料原材料企业生产生产工艺必须稳定控原材料购供应商应详述原材料外购方源外购方提供质量标准出厂检定报告性指标证书该原材料货质量检验资料
1探针：明确探针类型（序列特异性探针着丝粒探针等）提供该探针序列选择明确结合位点序列长度染色体区带位置采FISH分析结合染色体显带方法进行定位检测位点存种异常形式（例断裂点）应合理设计探针避免漏检探针结合位点基组图谱位置应具特异性检索基组数库果发现靶序列基组区域序列具源性应进行评估量避免交叉杂交信号出现应探针浓度纯度标记荧光信号基团进行核实进行功性试验验证检测性探针企业生产应描述克隆培养鉴定荧光标记纯化等程外购应提供合成机构出具合成产物质检证明
2荧光染料：描述荧光染料名称详细特征例发射吸收波长标记持续激发光源射时抗淬灭力等
3杂交缓液：描述配方组成质量标准确认提供合适离子杂交环境
4背景信号封闭剂：描述采取降低背景信号方法果采背景信号封闭剂（例： Cot1 DNA）应确认封闭效果
5细胞核复染剂：般包含二脒基苯基吲哚（DAPI）抗褪色剂细胞核DNA染色时防止荧光信号淬灭描述配方组成质量标准
6质控品（）：建议试剂盒中包含验证质控品利控制FISH试验质量试剂制备杂交程进行质控统结果判读标准辅助改善实验室间精密度准确度质控品质控玻片固定细胞悬液试剂盒中包含质控品应详述制备确认方法质控品样源已知结果床样细胞系质控品结果求应验证予明确
7企业参考品：应包含阳性参考品阴性参考品特异性参考品精密度参考品详细说明参考品样类型组成制备保存情况参考品应染色体核型分析合理方法确认阴阳性阳性参考品应涵盖染色体异常信号类型阴性参考品验证干扰交叉反应情况特异性参考品验证探针杂交位点特异性精密度参考品验证产品重复性阳性参考品阴性参考品精密度参考品采床样细胞系特异性参考品应采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞产品适种样类型样类型间存显著性差异需分设置企业参考品
（三）生产工艺反应体系研究资料
应描述生产工艺确定详述探针标记工作液配制检验分装包装等工序步骤质量关键控制点流程图表示
申请应建立适反应体系获准确检测结果果产品涉样处理检测程方案应方案致性予验证应述容进行研究评价指标包括探针信号强度杂交效率交叉杂交非特异性结合背景强度
1样求
11样采集：研究确定样采集时间（例特定孕周范围）佳采集体积检测样量产品适样类型（例：羊水细胞绒毛膜细胞脐血细胞骨髓细胞外周血细胞新鲜样培养样）应分予研究明确检测细胞阶段例：间期中期
12样固定制片：应低渗时间预固定时间滴片细胞密度等进行研究产品适样玻片类型例培养未培养细胞细胞悬液玻片细胞涂片流式细胞仪分选细胞玻片应分进行研究
13 玻片预处理：预处理条件进行研究需蛋白酶消化应消化条件进行重点研究优化蛋白酶量消化时间量减少消化充分造成非特异性结合时避免消化强造成DNA损失产品适样玻片类型应分进行研究
2试剂量：探针等试剂成分量进行优化采量进行试验通衡全部探针杂交信号强度非特异信号背景强度选取佳量
3反应条件：杂交程包括变性（样探针DNA单链化）杂交洗涤细胞核复染程中反应条件提高杂交效率减少交叉杂交关重优化变性温度时间杂交温度时间研究杂交仪代仪器适性研究杂交洗涤条件（包括洗涤液组分洗涤温度洗涤时间）试剂盒中包含种探针时需种探针均进行杂交反应条件优化终选择试剂佳反应条件
4计数细胞量：提供结果判读需计数细胞量确定计数细胞量适样类型预期途试剂杂交效率精密度低检测限等素关
（四）分析性评估资料
申请应批产品进行研究建立稳定性指标需提交产品研制成品验证阶段试剂盒进行性评价研究资料包括方案设计研究方法材料设备试验数（包括代表性彩色图片）结果统计分析等详细资料建议着重性指标进行研究：
1探针敏感性
试剂中探针结合靶序列力称杂交效率通研究靶序列检测概率进行评估例：分析n细胞中2n条染色体显示荧光信号染色体例应低95采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞进行评估
2探针特异性
试剂区分样中靶序列序列力通研究杂交信号否特异结合靶序列进行评估例：分析n细胞中2n条染色体特异杂交染色体正确位置例应低95采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞进行检测结合显带技术进行观察
果出现交叉杂交应考虑靶序列交叉杂交序列源性程度否存相似染色体异常类型等问题应述规报告交叉杂交结果：
A靶序列外位置检测信号细胞例
B细胞份样中交叉杂交染色体区域数量
C标准系统命名确定交叉杂交染色体位置描述非靶序列
3阴阳性符合率
采例已知结果床样进行制片检测阳性样应包括靶序列染色体异常类型信号类型阴性样应包括野生型易混淆异常阴阳性样检测结果均应阈值范围
4精密度
研究试剂种条件染色体异常类型例（尤医学相关水附）精密度应批批间差异进行研究考虑运行运行间日间员间实验室间等素检测结果影响检测结果应致者变异系数（CV）合理范围
5低检出限
试剂检测阳性信号细胞占规定计数细胞百分低检出限计数细胞总数密切相关通设置计数细胞量确定产品低检出限采合理方法确定阳性细胞例样采阴阳性细胞例混合方法设置阳性细胞例梯度进行研究
6干扰物质
说明样中潜干扰物质样处理制片程中干扰物质采集程中细胞污染等研究干扰物质检测结果影响
果产品适种样类型应进行样适性研究应量采床样分提供种样类型性评估资料
（五）阳性判断值确定资料
类试剂阳性判断值够区分染色体异常否阈值应入组已知靶序列异常状态床样包括阳性阴性阳性判断值附样研究预设阳性判断值建议采受试者工作特征曲线（ROC）分析方法申请应采床样预设阳性判断值进行验证样类型会导致阳性判断值差异果试剂盒适样类型应样类型阳性判断值进行验证果涉染色体异常类型信号类型需设置两阳性判断值时应分进行研究验证
（六）稳定性研究资料
1试剂稳定性：申请应充分考虑产品储存运输程中利条件进行实时稳定性（效期）开瓶稳定性运输稳定性冻融稳定性光稳定性研究申请根实际需选择合理稳定性研究方案稳定性研究资料应包括研究方法确定具体实施方案研究数结实时稳定性研究应提供少三批样品实际储存条件保存成品效期研究资料
2样稳定性：申请应充分考虑样采集处理运输储存等阶段条件研究确定样保存条件时间包括采集样保存处理细胞玻片保存杂交玻片信号会着温度升高时间延长减弱应研究种保存条件时间荧光信号强度受影响
（七）床评价资料
床试验总体求床试验资料容应符合相关法规指导原规定申请应符合求床机构满足床试验低样量求前提根产品床预期途相关疾病流行率统计学求制定够证明床性床试验方案时限度控制试验误差提高试验质量试验结果进行科学合理分析
1床试验机构员
申请应选定少3家（含3家）已备案医疗器械床试验机构关规定开展床试验床试验机构应具备完善细胞遗传学检测力操作者阅片者应荧光原位杂交技术应领域具丰富验产品床试验机构操作员求申请应综合产品预期途进行考虑例：基产前诊断途床研究机构应已取产前诊断技术服务资质医疗机构机构员应遵循产前诊断技术理办法母婴保健专项技术服务许员资格理办法
2床试验方案
21床试验实施前研究员应流行病学统计学床医学检验医学等方面考虑设计科学合理床试验方案床试验机构方案设置应基致保证整床试验程中遵循预定方案实施意改动整试验程应床试验机构实验室实验室技术员操作完成申报机构技术员进行必技术指导外意干涉试验进程尤数收集程
22床样应方案中明确采集时间样类型样质量求该类求应产品说明书中相应容致
23试验方案中应确定严格病例入选排标准已入选病例排出床试验时应记录案明确说明原试验操作程中判定试验结果时应采盲法保证试验结果客观性
24床试验程中家机构应说明书描述遵循致判读标准包括细胞选择判读分析结果解释等
25需提供访资料应包括限容：访操作记录员复核员访方式访项目判定访时间周期间隔访终点等
3试验方法
31申请应综合考虑产品预期途反应原理检测方法等素选择合理床试验方法建议采染色体核型分析踪访等金标准进行较研究评价试验体外诊断试剂（称考核试剂）床敏感性床特异性证明床性满足预期途求染色体数目检测试剂染色体核型分析辨识染色体异常检测试剂均应采述方法进行床试验
适样类型难培养获中期分裂相试剂染色体核型分析难辨识染色体异常检测试剂选择床试验机构已建立床参考标准进行床试验例：疾病诊断参考方法等应详细描述采床参考标准确保选择合理性
32申请应结合具体产品预期途进行床试验该类产品作胎遗传性疾病白血病等疾病诊断方法果申报产品具指导药预期途应提供指导药相关证申报产品具治疗监测预判定等预期途应设计相应试验方案例治疗前踪研究必时进行访研究等申报产品具体指导原应参执行
4受试者选择阳性例数
床试验应申报产品适群作研究象疾病类型应涵盖申报产品声称疾病种类例疾病类型病程分期等应纳入定数量医学决定水附样阴性病例选择应考虑验证干扰素交叉反应需应包括易混淆疾病染色体区域异常类型等床角度考察分析特异性
明确出样量确定建议统计学原阳性样获行性角度综合计算阳性例数床试验阳性样量原应满足统计学求产品检测靶序列靶序列应单独估算阴性阳性例数申报产品检测某靶序列异常形式存差异均具床意义（例断裂点次断裂点）种异常形式均应定量阳性例数
产品适种细胞样类型应样类型分进行床验证
5统计学分析
床试验结果统计应选择合适统计方法指标灵敏度特异度准确度95置信区间等常选择交叉四格表形式总结该检测结果采kappa检验验证检测结果致性时出致性检验结果床试验方案中应明确统计检验假设评价考核试剂参方法否等效标准
应详细描述致检测结果方案中明确否需进步复测确认致原进行分析
（八）产品技术求
产品技术求应符合相关法规指导原规定类试剂性指标包括：外观荧光信号强度敏感性特异性阳性符合率阴性符合率精密度等果申报试剂已适国家参考品标准品发布申请应产品技术求中提出检测求
（九）产品说明书
产品说明书格式应符合相关法规指导原求境外试剂中文说明书格式求外容应量保持原文说明书致翻译力求准确符合中文表达惯产品说明书容均应申请提交注册申报资料中相关研究结果保持致面基细胞荧光原位杂交法类染色体异常检测试剂说明书重点容进行说明
1预期途
应少包括容：
11说明产品预期途描述样类型检测位点异常类型
例：产品检测羊水细胞中131821号染色体数目产品定性检测白血病患者骨髓样中BCRABL融合基
12说明预期途相关床适应症背景情况说明相关床实验室诊断方法应包括适群特征介绍例高危群床疑似已诊断患某疾病群
13 根产品预期途进行合理限制例：产品仅检测靶染色体数目异常检测染色体数目结构异常
14检测结果仅供床参考需确诊请结合床症状检测手段作床诊断排唯标准
2检测原理
详细说明产品检测原理应包括探针荧光信号标记结果观察等信息建议结合文字图示探针类型长度位点进行描述
3组成成分
31说明试剂盒包含组分名称数量例浓度等信息应包括探针信息质控品（）样信息说明批号试剂盒中组分否互换
32试剂盒中包含该项检测必需组分应列出相关试剂仪器名称质控品（适）名称货号化学制剂纯度浓度（适）仪器配置功求耗材规格（材质）求
4储存条件效期
试剂储存条件效期开瓶稳定性冻融次数限制等信息做详细介绍应包括避光求试剂盒包含质控品应处明确质控品稳定性应注明生产日期期限者失效日期
5适仪器
明确配套荧光显微镜配置求应具备合适放倍数目镜物镜油镜具备相应激发波长发射波长滤片组滤块
6样求
61样类型采集：明确适样类型采集时间采集体积抗凝剂（适）应明确说明取样程中避免细胞外源DNA污染需培养应说明细胞培养具体方式
62样稳定性：明确样采集处理（固定细胞悬液玻片）保存条件保存时间
7检验方法
71试剂配制：描述方法步骤配制保存条件效期试剂反复次数种情况表明试剂变质DAPI等致癌物操作注意事项等
72样处理玻片制备：详述低渗固定滴片老化预处理等步骤应前期研究资料致样玻片类型操作应分予描述
73变性杂交洗涤复染：详述操作步骤包括处理时间温度注意事项等容
74玻片储存：说明种保存条件时间荧光信号强度受影响
75观察结果分析：
描述读取样玻片例：探针杂交信号应明亮清晰易分辨背景应黑色点状朦胧荧光
描述读取细胞例：细胞分布合理重叠细胞结构完整边界清晰等
细胞计数：计数定数量细胞核调焦找核信号明确正常信号异常信号特点涉种异常信号均应详细说明建议采文字结合图示方法明确细胞信号计数计数规列表方式列举结果观察中遇问题原解决方案说明细胞核数量足时处理方式
质量控制：质控品应样时进行检测监测实验完成情况判断信号计数准确性明确质控品频率质控品判读标准应样致试剂盒中包含质控品应介绍样源结果信息试剂盒中包含质控品应明确配套质控品信息明确质控品结果求符合求时处理措施
8阳性判断值：应明确阳性阴性全部信号类型应阈值应阳性判断值确定资料致
9检验结果解释：求计数定数量细胞核根阳性判断值结果做出正常异常解释结合图示方式信号类型进行解释明确种结果需进行扩计数重新杂交判断实验效
10检验方法局限性
综合产品预期途床背景检测方法等信息出现局限性进行相关说明包括描述请申请选择适条款产品说明书中予阐述
101产品检测结果应结合病史危险素实验室检查结果做出床诊断仅产品检测结果采取逆治疗措施
102果样污染细胞数量足样玻片准备实验结果效
103描述产品检测异常信号类型例罕见异常染色体结构异常低水嵌合等
104描述产品够检测区分信号类型
105指出具体样类型检测中出现影响素例：产前染色体数目检测试剂检测绒毛膜样时嵌合现象影响产品性
11产品性指标
根产品特征分析性评估资料详述性指标：
111外观：描述产品成分外观状态
112探针敏感性：说明敏感性研究细胞类型试验方法结果
113探针特异性：说明特异性研究细胞类型试验方法结果
114阴阳性符合率：说明阴阳性样信息符合率结果
115精密度：说明批批间精密度时间点员间精密度
116低检出限：明确产品检测低例嵌合水限
117干扰物质：明确样中常见干扰物质检测结果影响
118床试验数总结
12注意事项
121生物样安全性警告
122试剂安全性警告
123非说明书描述配套试剂会影响结果
124未说明书进行标准操作会结果产生良影响
125涉荧光染料溶液玻片储存操作均应避光弱光进行
126应严格控制反应温度校准温度计测定溶液水浴槽温箱温度者定期校准相关仪器
三名词解释
床参考标准：现条件床获够确定受试者目标状态（健康状态疾病状态疾病进程指导床处置疾病健康状态等）佳方法通常床实验室医学实践包括：现条件公认权威疾病诊断标准（组织病理学检查影学检查病原体分离培养鉴定长期访结等）疾病诊疗指南中明确疾病诊断方法行业专家识床公认合理参考方法等床参考标准种方法种方法相结合
四编写单位
国家药品监督理局医疗器械技术审评中心
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基细胞荧光原位杂交法类染色体异常
检测试剂注册技术审查指导原
指导原旨指导注册申请基细胞荧光原位杂交法（Fluorescence In Situ HybridizationFISH）类染色体异常检测试剂注册申报资料准备撰写时技术审评部门审评注册申报资料提供参考
指导原基细胞荧光原位杂交法类染色体异常检测试剂般求申请应产品具体特性确定中容否适适需具体阐述理相应科学产品具体特性注册申报资料容进行充实细化
指导原供申请审查员指导性文件包括注册审批涉行政事项作法规强制执行果够满足相关法规求方法采需提供详细研究资料验证资料相关员应遵循相关法规前提指导原
指导原现行法规标准体系前认知水制定着法规标准断完善科学技术断发展指导原相关容适时进行调整
适范围
指导原述染色体异常类型包括染色体数目异常结构异常（包括异位倒位导致基断裂融合）扩增缺失等例产前羊水细胞中染色体数目异常白血病患者骨髓细胞中BCRABL基融合等
检测类染色体异常方法染色体核型分析原位杂交法PCR法高通量测序法等方法检测染色体异常类型片段操作求等方面具特点指导原适需进行注册审批方市采荧光原位杂交法检测类细胞样中染色体异常检测试剂荧光原位杂交法指根碱基互补配原目标DNA配核酸片段标记荧光染料（探针）该探针检样中相应核酸片段定条件特异结合（杂交）形成双链核酸助荧光显微镜观察记录形成杂交双链类型数量处染色体区带位置判断检样中否存染色体异常检测方法指导原基荧光原位杂交法撰写成显色原位杂交法银增强原位杂交法等亮视野原位杂交法适
指导原适样类型类细胞样适石蜡包埋细胞学组织学切片进行检测试剂微生物检测试剂
文针采荧光原位杂交法检测类细胞样中染色体异常检测试剂通指导原申请应结合具体产品特点进行注册申报果申报产品具体指导原应执行
指导原适进行产品注册相关许事项变更产品包括申报资料中部分项目求未事宜应符合体外诊断试剂注册理办法（国家食品药品监督理总局令第5号简称办法）等相关法规求
二注册申报资料求
注册申报资料撰写应符合关公布体外诊断试剂注册申报资料求批准证明文件格式公告（国家食品药品监督理总局公告2014年第44号）（简称2014年第44号公告）相关求容包括：
（）综述资料
1产品预期途描述产品预期途预期途相关床背景情况说明检测位点靶序列（Target SequenceTS）包括靶序列长度异常类型特异性信息说明相关床适应症该异常适应症中发生情况频率适应症发生率适群等说明具体床意义例：否诊断分型治疗方案选择预判断微量残留病监测等介绍相关床实验室诊断方法
2产品描述描述产品采技术原理包括杂交反应信号结果描述原材料源制备方法生产工艺程参考品制备确认方法
3关生物安全性方面说明
4关产品研究结果总结评价
5包括类产品国外批准市情况类产品采技术方法检测位点样类型荧光信号标记床应等进行分析阐明申请注册产品国外类产品优势局限性新研制体外诊断试剂产品需提供测物预期床适应症间关系文献资料
（二）原材料研究资料
应提供原材料源选择制备程质量分析质量控制标准等研究资料原材料企业生产生产工艺必须稳定控原材料购供应商应详述原材料外购方源外购方提供质量标准出厂检定报告性指标证书该原材料货质量检验资料
1探针：明确探针类型（序列特异性探针着丝粒探针等）提供该探针序列选择明确结合位点序列长度染色体区带位置采FISH分析结合染色体显带方法进行定位检测位点存种异常形式（例断裂点）应合理设计探针避免漏检探针结合位点基组图谱位置应具特异性检索基组数库果发现靶序列基组区域序列具源性应进行评估量避免交叉杂交信号出现应探针浓度纯度标记荧光信号基团进行核实进行功性试验验证检测性探针企业生产应描述克隆培养鉴定荧光标记纯化等程外购应提供合成机构出具合成产物质检证明
2荧光染料：描述荧光染料名称详细特征例发射吸收波长标记持续激发光源射时抗淬灭力等
3杂交缓液：描述配方组成质量标准确认提供合适离子杂交环境
4背景信号封闭剂：描述采取降低背景信号方法果采背景信号封闭剂（例： Cot1 DNA）应确认封闭效果
5细胞核复染剂：般包含二脒基苯基吲哚（DAPI）抗褪色剂细胞核DNA染色时防止荧光信号淬灭描述配方组成质量标准
6质控品（）：建议试剂盒中包含验证质控品利控制FISH试验质量试剂制备杂交程进行质控统结果判读标准辅助改善实验室间精密度准确度质控品质控玻片固定细胞悬液试剂盒中包含质控品应详述制备确认方法质控品样源已知结果床样细胞系质控品结果求应验证予明确
7企业参考品：应包含阳性参考品阴性参考品特异性参考品精密度参考品详细说明参考品样类型组成制备保存情况参考品应染色体核型分析合理方法确认阴阳性阳性参考品应涵盖染色体异常信号类型阴性参考品验证干扰交叉反应情况特异性参考品验证探针杂交位点特异性精密度参考品验证产品重复性阳性参考品阴性参考品精密度参考品采床样细胞系特异性参考品应采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞产品适种样类型样类型间存显著性差异需分设置企业参考品
（三）生产工艺反应体系研究资料
应描述生产工艺确定详述探针标记工作液配制检验分装包装等工序步骤质量关键控制点流程图表示
申请应建立适反应体系获准确检测结果果产品涉样处理检测程方案应方案致性予验证应述容进行研究评价指标包括探针信号强度杂交效率交叉杂交非特异性结合背景强度
1样求
11样采集：研究确定样采集时间（例特定孕周范围）佳采集体积检测样量产品适样类型（例：羊水细胞绒毛膜细胞脐血细胞骨髓细胞外周血细胞新鲜样培养样）应分予研究明确检测细胞阶段例：间期中期
12样固定制片：应低渗时间预固定时间滴片细胞密度等进行研究产品适样玻片类型例培养未培养细胞细胞悬液玻片细胞涂片流式细胞仪分选细胞玻片应分进行研究
13 玻片预处理：预处理条件进行研究需蛋白酶消化应消化条件进行重点研究优化蛋白酶量消化时间量减少消化充分造成非特异性结合时避免消化强造成DNA损失产品适样玻片类型应分进行研究
2试剂量：探针等试剂成分量进行优化采量进行试验通衡全部探针杂交信号强度非特异信号背景强度选取佳量
3反应条件：杂交程包括变性（样探针DNA单链化）杂交洗涤细胞核复染程中反应条件提高杂交效率减少交叉杂交关重优化变性温度时间杂交温度时间研究杂交仪代仪器适性研究杂交洗涤条件（包括洗涤液组分洗涤温度洗涤时间）试剂盒中包含种探针时需种探针均进行杂交反应条件优化终选择试剂佳反应条件
4计数细胞量：提供结果判读需计数细胞量确定计数细胞量适样类型预期途试剂杂交效率精密度低检测限等素关
（四）分析性评估资料
申请应批产品进行研究建立稳定性指标需提交产品研制成品验证阶段试剂盒进行性评价研究资料包括方案设计研究方法材料设备试验数（包括代表性彩色图片）结果统计分析等详细资料建议着重性指标进行研究：
1探针敏感性
试剂中探针结合靶序列力称杂交效率通研究靶序列检测概率进行评估例：分析n细胞中2n条染色体显示荧光信号染色体例应低95采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞进行评估
2探针特异性
试剂区分样中靶序列序列力通研究杂交信号否特异结合靶序列进行评估例：分析n细胞中2n条染色体特异杂交染色体正确位置例应低95采处中期分裂相正常外周血（培养液）淋巴细胞进行检测结合显带技术进行观察
果出现交叉杂交应考虑靶序列交叉杂交序列源性程度否存相似染色体异常类型等问题应述规报告交叉杂交结果：
A靶序列外位置检测信号细胞例
B细胞份样中交叉杂交染色体区域数量
C标准系统命名确定交叉杂交染色体位置描述非靶序列
3阴阳性符合率
采例已知结果床样进行制片检测阳性样应包括靶序列染色体异常类型信号类型阴性样应包括野生型易混淆异常阴阳性样检测结果均应阈值范围
4精密度
研究试剂种条件染色体异常类型例（尤医学相关水附）精密度应批批间差异进行研究考虑运行运行间日间员间实验室间等素检测结果影响检测结果应致者变异系数（CV）合理范围
5低检出限
试剂检测阳性信号细胞占规定计数细胞百分低检出限计数细胞总数密切相关通设置计数细胞量确定产品低检出限采合理方法确定阳性细胞例样采阴阳性细胞例混合方法设置阳性细胞例梯度进行研究
6干扰物质
说明样中潜干扰物质样处理制片程中干扰物质采集程中细胞污染等研究干扰物质检测结果影响
果产品适种样类型应进行样适性研究应量采床样分提供种样类型性评估资料
（五）阳性判断值确定资料
类试剂阳性判断值够区分染色体异常否阈值应入组已知靶序列异常状态床样包括阳性阴性阳性判断值附样研究预设阳性判断值建议采受试者工作特征曲线（ROC）分析方法申请应采床样预设阳性判断值进行验证样类型会导致阳性判断值差异果试剂盒适样类型应样类型阳性判断值进行验证果涉染色体异常类型信号类型需设置两阳性判断值时应分进行研究验证
（六）稳定性研究资料
1试剂稳定性：申请应充分考虑产品储存运输程中利条件进行实时稳定性（效期）开瓶稳定性运输稳定性冻融稳定性光稳定性研究申请根实际需选择合理稳定性研究方案稳定性研究资料应包括研究方法确定具体实施方案研究数结实时稳定性研究应提供少三批样品实际储存条件保存成品效期研究资料
2样稳定性：申请应充分考虑样采集处理运输储存等阶段条件研究确定样保存条件时间包括采集样保存处理细胞玻片保存杂交玻片信号会着温度升高时间延长减弱应研究种保存条件时间荧光信号强度受影响
（七）床评价资料
床试验总体求床试验资料容应符合相关法规指导原规定申请应符合求床机构满足床试验低样量求前提根产品床预期途相关疾病流行率统计学求制定够证明床性床试验方案时限度控制试验误差提高试验质量试验结果进行科学合理分析
1床试验机构员
申请应选定少3家（含3家）已备案医疗器械床试验机构关规定开展床试验床试验机构应具备完善细胞遗传学检测力操作者阅片者应荧光原位杂交技术应领域具丰富验产品床试验机构操作员求申请应综合产品预期途进行考虑例：基产前诊断途床研究机构应已取产前诊断技术服务资质医疗机构机构员应遵循产前诊断技术理办法母婴保健专项技术服务许员资格理办法
2床试验方案
21床试验实施前研究员应流行病学统计学床医学检验医学等方面考虑设计科学合理床试验方案床试验机构方案设置应基致保证整床试验程中遵循预定方案实施意改动整试验程应床试验机构实验室实验室技术员操作完成申报机构技术员进行必技术指导外意干涉试验进程尤数收集程
22床样应方案中明确采集时间样类型样质量求该类求应产品说明书中相应容致
23试验方案中应确定严格病例入选排标准已入选病例排出床试验时应记录案明确说明原试验操作程中判定试验结果时应采盲法保证试验结果客观性
24床试验程中家机构应说明书描述遵循致判读标准包括细胞选择判读分析结果解释等
25需提供访资料应包括限容：访操作记录员复核员访方式访项目判定访时间周期间隔访终点等
3试验方法
31申请应综合考虑产品预期途反应原理检测方法等素选择合理床试验方法建议采染色体核型分析踪访等金标准进行较研究评价试验体外诊断试剂（称考核试剂）床敏感性床特异性证明床性满足预期途求染色体数目检测试剂染色体核型分析辨识染色体异常检测试剂均应采述方法进行床试验
适样类型难培养获中期分裂相试剂染色体核型分析难辨识染色体异常检测试剂选择床试验机构已建立床参考标准进行床试验例：疾病诊断参考方法等应详细描述采床参考标准确保选择合理性
32申请应结合具体产品预期途进行床试验该类产品作胎遗传性疾病白血病等疾病诊断方法果申报产品具指导药预期途应提供指导药相关证申报产品具治疗监测预判定等预期途应设计相应试验方案例治疗前踪研究必时进行访研究等申报产品具体指导原应参执行
4受试者选择阳性例数
床试验应申报产品适群作研究象疾病类型应涵盖申报产品声称疾病种类例疾病类型病程分期等应纳入定数量医学决定水附样阴性病例选择应考虑验证干扰素交叉反应需应包括易混淆疾病染色体区域异常类型等床角度考察分析特异性
明确出样量确定建议统计学原阳性样获行性角度综合计算阳性例数床试验阳性样量原应满足统计学求产品检测靶序列靶序列应单独估算阴性阳性例数申报产品检测某靶序列异常形式存差异均具床意义（例断裂点次断裂点）种异常形式均应定量阳性例数
产品适种细胞样类型应样类型分进行床验证
5统计学分析
床试验结果统计应选择合适统计方法指标灵敏度特异度准确度95置信区间等常选择交叉四格表形式总结该检测结果采kappa检验验证检测结果致性时出致性检验结果床试验方案中应明确统计检验假设评价考核试剂参方法否等效标准
应详细描述致检测结果方案中明确否需进步复测确认致原进行分析
（八）产品技术求
产品技术求应符合相关法规指导原规定类试剂性指标包括：外观荧光信号强度敏感性特异性阳性符合率阴性符合率精密度等果申报试剂已适国家参考品标准品发布申请应产品技术求中提出检测求
（九）产品说明书
产品说明书格式应符合相关法规指导原求境外试剂中文说明书格式求外容应量保持原文说明书致翻译力求准确符合中文表达惯产品说明书容均应申请提交注册申报资料中相关研究结果保持致面基细胞荧光原位杂交法类染色体异常检测试剂说明书重点容进行说明
1预期途
应少包括容：
11说明产品预期途描述样类型检测位点异常类型
例：产品检测羊水细胞中131821号染色体数目产品定性检测白血病患者骨髓样中BCRABL融合基
12说明预期途相关床适应症背景情况说明相关床实验室诊断方法应包括适群特征介绍例高危群床疑似已诊断患某疾病群
13 根产品预期途进行合理限制例：产品仅检测靶染色体数目异常检测染色体数目结构异常
14检测结果仅供床参考需确诊请结合床症状检测手段作床诊断排唯标准
2检测原理
详细说明产品检测原理应包括探针荧光信号标记结果观察等信息建议结合文字图示探针类型长度位点进行描述
3组成成分
31说明试剂盒包含组分名称数量例浓度等信息应包括探针信息质控品（）样信息说明批号试剂盒中组分否互换
32试剂盒中包含该项检测必需组分应列出相关试剂仪器名称质控品（适）名称货号化学制剂纯度浓度（适）仪器配置功求耗材规格（材质）求
4储存条件效期
试剂储存条件效期开瓶稳定性冻融次数限制等信息做详细介绍应包括避光求试剂盒包含质控品应处明确质控品稳定性应注明生产日期期限者失效日期
5适仪器
明确配套荧光显微镜配置求应具备合适放倍数目镜物镜油镜具备相应激发波长发射波长滤片组滤块
6样求
61样类型采集：明确适样类型采集时间采集体积抗凝剂（适）应明确说明取样程中避免细胞外源DNA污染需培养应说明细胞培养具体方式
62样稳定性：明确样采集处理（固定细胞悬液玻片）保存条件保存时间
7检验方法
71试剂配制：描述方法步骤配制保存条件效期试剂反复次数种情况表明试剂变质DAPI等致癌物操作注意事项等
72样处理玻片制备：详述低渗固定滴片老化预处理等步骤应前期研究资料致样玻片类型操作应分予描述
73变性杂交洗涤复染：详述操作步骤包括处理时间温度注意事项等容
74玻片储存：说明种保存条件时间荧光信号强度受影响
75观察结果分析：
描述读取样玻片例：探针杂交信号应明亮清晰易分辨背景应黑色点状朦胧荧光
描述读取细胞例：细胞分布合理重叠细胞结构完整边界清晰等
细胞计数：计数定数量细胞核调焦找核信号明确正常信号异常信号特点涉种异常信号均应详细说明建议采文字结合图示方法明确细胞信号计数计数规列表方式列举结果观察中遇问题原解决方案说明细胞核数量足时处理方式
质量控制：质控品应样时进行检测监测实验完成情况判断信号计数准确性明确质控品频率质控品判读标准应样致试剂盒中包含质控品应介绍样源结果信息试剂盒中包含质控品应明确配套质控品信息明确质控品结果求符合求时处理措施
8阳性判断值：应明确阳性阴性全部信号类型应阈值应阳性判断值确定资料致
9检验结果解释：求计数定数量细胞核根阳性判断值结果做出正常异常解释结合图示方式信号类型进行解释明确种结果需进行扩计数重新杂交判断实验效
10检验方法局限性
综合产品预期途床背景检测方法等信息出现局限性进行相关说明包括描述请申请选择适条款产品说明书中予阐述
101产品检测结果应结合病史危险素实验室检查结果做出床诊断仅产品检测结果采取逆治疗措施
102果样污染细胞数量足样玻片准备实验结果效
103描述产品检测异常信号类型例罕见异常染色体结构异常低水嵌合等
104描述产品够检测区分信号类型
105指出具体样类型检测中出现影响素例：产前染色体数目检测试剂检测绒毛膜样时嵌合现象影响产品性
11产品性指标
根产品特征分析性评估资料详述性指标：
111外观：描述产品成分外观状态
112探针敏感性：说明敏感性研究细胞类型试验方法结果
113探针特异性：说明特异性研究细胞类型试验方法结果
114阴阳性符合率：说明阴阳性样信息符合率结果
115精密度：说明批批间精密度时间点员间精密度
116低检出限：明确产品检测低例嵌合水限
117干扰物质：明确样中常见干扰物质检测结果影响
118床试验数总结
12注意事项
121生物样安全性警告
122试剂安全性警告
123非说明书描述配套试剂会影响结果
124未说明书进行标准操作会结果产生良影响
125涉荧光染料溶液玻片储存操作均应避光弱光进行
126应严格控制反应温度校准温度计测定溶液水浴槽温箱温度者定期校准相关仪器
三名词解释
床参考标准：现条件床获够确定受试者目标状态（健康状态疾病状态疾病进程指导床处置疾病健康状态等）佳方法通常床实验室医学实践包括：现条件公认权威疾病诊断标准（组织病理学检查影学检查病原体分离培养鉴定长期访结等）疾病诊疗指南中明确疾病诊断方法行业专家识床公认合理参考方法等床参考标准种方法种方法相结合
四编写单位
国家药品监督理局医疗器械技术审评中心
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